规范化基因剔除小鼠技术体系的研究

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基因剔除小鼠的技术体系是生命科学研究,尤其是人类基因组计划和医学实验动物模型等领域所急需的关健技术。基因剔除小鼠的建立是一项复杂的系统工程,本研究对基因剔除小鼠技术体系的关键技术环节进行了完善和规范:优化了ES细胞的基本培养条件;应用条件培养液筛选、富集高嵌合潜能的ES细胞;成熟嵌合体的制备技术提高嵌合体的制备效率;改变胚胎的移植方式提高移植胚胎的产仔率等等,建立了一套高效的嵌合体制备体系。在此基础上,本研究还进行了小鼠糖皮质激素受体基因、核孔蛋白155基因和常染色体显性遗传型多囊肾病基因1基因剔除小鼠的研究,并分别获得了嵌合鼠。本研究还进行了诱导型基因剔除小鼠配套的Cre转基因小鼠的制备及Cre重组酶体外活性的检测。
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