论文部分内容阅读
山楂(Crataegus spp.)为蔷薇科苹果亚科山楂属植物,是一种药食兼备的重要果树资源,而黄酮类物质作为山楂中的主要活性成分之一,已被大量的研究证明了具有重要药理活性。本研究以山楂中黄酮类物质为研究对象,通过对山楂叶片生长季黄酮含量动态变化的研究,旨在确定以提取黄酮为目的的叶片最佳采收时期,并通过对山楂叶片黄酮含量QTL定位研究,为今后山楂分子标记辅助育种以及对黄酮含量相关基因的定位及克隆奠定基础。本试验采用高效液相色谱法,分析了山楂叶片黄酮含量在生长季的动态变化,选取两个黄酮合成高峰期以及一个山楂成熟期为三个关键时期,利用已构建的山楂高密度遗传图谱,采用Map QTL5.0作图软件,使用区间作图法,对三个关键时期的山楂叶片黄酮含量进行QTL定位分析,研究试材分别为‘山东大绵球’ב秋金星’的F1代杂交群体107株,与‘山东大绵球’ב新宾软籽’的F1代杂交群体130株。研究所得结果主要如下:1.黄酮含量的动态变化的数据由课题组提供,时期为2015年6月1日到10月9日,每隔10天采集一次样品,共15个时期,通过对这15个时期的山楂叶片黄酮含量进行测定分析,研究结果显示,山楂叶片的总黄酮含量在生长季的变化范围在0.2482%-1.100%之间,五种黄酮单体中,牡荆素鼠李糖苷的含量最高,其含量变化在0.2294%-1.0214%之间,山楂叶片总黄酮含量在生长季共有两个高峰期,分别在7月11日和8月20日,其中7月11日的总黄酮含量最高。2.在LOD≧3条件下,2018年‘山东大绵球’ב秋金星’的F1代杂交群体中共获得10个与叶片黄酮含量相关的QTL位点,这些QTL位点分布于5个连锁群中,表型贡献率为37.3%-84%;2019年‘山东大绵球’ב秋金星’的F1代杂交群体中,共获得29个相关QTL位点,这些QTL位点分布于15个连锁群中,表型贡献率范围为21.1%-92.9%;2019年‘山东大绵球’ב新宾软籽’的F1代杂交群体中共获得10个相关的QTL位点,这些QTL位点分布于5个连锁群中,表型贡献率分别为12.6%-58%。3.在所有检测到的位点中,不同时期重复被检测到的QTL共有6个,这些位点均在‘山东大绵球’ב秋金星’的F1代杂交群体中被检测到,其中,JSTG8-1在连续两年的8月20日这一时期均被检测到;SLTG8-2、JSTG8-3与JSTG9-1均定位在了连锁群LG6中89.97c M这一位置上,与标记位点m2172共分离,SLTG7-1、SLTG9-2均定位在连锁群LG13中22.72c M这一位置上,与标记位点m516共分离,SLTG8-3、SLTG9-1均定位在连锁群LG11上24.51c M这个位置上,与标记f551共分离,SLTG7-2与MJS8-1均定位在了连锁群LG14中36.76c M这一位置上,与标记位点f1518共分离,JSTG8-7与MJS9-1均定位在了连锁群LG15中55.78c M这一位置上,与标记位点dm918共分离,MJS7-2与JSTG7-1均定位在在连锁群LG12中的59.36c M这一位置上,与标记位点m2062共分离。2019年‘山东大绵球’ב新宾软籽’的F1代杂交群体中,未检测到在不同时期重复出现的QTL位点。