【摘 要】
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目的:对石花菜（Gelidium amansii）95%乙醇部位进行骨折治疗活性初步研究,对石花菜乙酸乙酯部位进行系统性化学成分的分离并将所得的化合物运用核磁共振等方法进行结构鉴定,以丰富海洋药物的研究资料。方法:在室温条件下,用冷浸法提取并制备石花菜95%乙醇提取物（GAE）,建立开放性大鼠股骨骨折模型,以Micro-CT、Elisa、q PCR为检测方法,初步评价GAE的促骨折愈合活性。运用萃
【基金项目】
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项目名称:广西蛇床子止痒活性成分追踪研究和机制探索,项目合同编号:2015GXNSFCA139021,项目来源:广西省自然科学基金项目,项目起止时间:2015年9月至2018年8月； 项目名称:广西大宗海洋生物废弃物综合利用及大健康系列产品研发与产业化,项目合同编号:桂科AA17204085,项目来源:广西创新驱动发展专项资金项目,项目起止时间:2017年9月至2
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目的:对石花菜（Gelidium amansii）95%乙醇部位进行骨折治疗活性初步研究,对石花菜乙酸乙酯部位进行系统性化学成分的分离并将所得的化合物运用核磁共振等方法进行结构鉴定,以丰富海洋药物的研究资料。方法:在室温条件下,用冷浸法提取并制备石花菜95%乙醇提取物（GAE）,建立开放性大鼠股骨骨折模型,以Micro-CT、Elisa、q PCR为检测方法,初步评价GAE的促骨折愈合活性。运用萃取的方法从GAE中获得乙酸乙酯提取物（GAEA）,并综合运用硅胶柱层析色谱法,葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析色谱法、薄层色谱法、重结晶等手段对GAEA进行系统性的化学成分分离及纯化,并根据所得化合物的理化性质结合现代波谱分析手段进行结构鉴定。结果:骨折实验表明GAE治疗后的大鼠股骨创面愈合良好,股骨外表面较模型组明显光滑完整,无明显裂缝。大鼠股骨骨体积分数BV/TV、骨小梁厚度Tb.Th、骨密度BMD及骨各向异性程度DA相比模型组有不同程度的升高,其中GAE低剂量组与模型组相比BV/TV、Tb.Th、BMD和DA分别升高了0.39%、129%、23.4%和98.6%（P＜0.05）,对BS/BV和Tb.Sp也有明显的改善（P＜0.05）,效果较高剂量组明显。同时GAE低剂量组可以上调软骨标志物Col2α1,Aggrecan和Sox9的表达,具有一定促Ⅱ型胶原蛋白再生和软骨细胞修复的功能。炎症方面,GAE治疗四周后血清中TNF-α炎症水平明显降低（P＜0.05）。化学成分的研究中,本文首次从石花菜乙酸乙酯层中分离了13个化学成分,鉴定出了9个化合物,其结构分别为:胆甾醇（1）、β-谷甾醇（2）、丁二酸（3）、硬脂酸（4）、胆甾醇十五烷酸酯（5）、9,10-蒽醌（6）、正十五烷酸（7）、对苯二甲酸双（2-乙基己基）酯（8）、邻苯二甲酸双（2-乙基己基）酯（9）。结论:本文首次对石花菜的促骨折愈合药理活性以及化学成分进行初步研究,结果表明GAE具有一定抑制炎症反应、诱导软骨分化、增加骨组织骨量、促进骨组织生长修复、保护骨细胞从而促进骨折愈合的药理作用。并首次从GAEA中分离纯化并鉴定了9个单体化合物。
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