研究目的:本课题以传统中医学对高血压的认识为基础,通过针刺SHR的太溪穴,对比非穴组、模型组和正常WKY组,发现针刺降压起效时间点,然后运用PET-CT成像技术,通过检测脑区葡萄糖的代谢水平来寻找降压靶脑区,探索针刺太溪穴对SHR的降压靶脑区效应及其可能存在的中枢降压机制。探寻针刺降压作用时间点和可能存在新的中枢降压靶点,为针灸治疗高血压病提供科学依据,也为探寻针灸治病机理的物质途径提供新的思路。研究方法:(1)确定经穴的降压作用时效规律选用SPF级10周龄SHR24只,(雄性,体重180~200克,收缩压≥140mm Hg),随机分为太溪组、非穴组和对照组,每组8只,正常血压WKY大鼠8只。太溪组和非穴组大鼠分别针刺,方案如下:在大鼠清醒状态下固定,针刺左右腧穴;针刺行捻转手法,捻转频率为80±5次/分钟,捻转幅度为180±5度;每个穴位操作2.5分钟,左右两穴共计5分钟;每天上午治疗1次,连续针刺7次。对照组大鼠,按针刺组针刺时的固定方法固定5分钟,不予针刺。根据《实验针灸学》有关动物取穴的方法定位取太溪、非穴进行针刺。血压值测定采用尾动脉测压法测量大鼠的血压,每只大鼠连续测量15次,取平均血压值。测量时间点包括针刺前、针刺后30分钟、针刺后60分钟、针刺后90分钟的血压值。确定降压效果后,进入PET-CT扫描。(2)确定针刺激活脑内特异性的关键脑区。确定降压效果后,对各组大鼠进行PET-CT扫描。根据针刺效应的时间点,进行即刻PET-CT扫描和疗程后PET-CT扫描。即刻PET-CT扫描:根据降压起效时间确定针刺后即刻PET-CT扫描时间,首先固定大鼠,太溪组、非穴组SHR针刺干预共5分钟,每个穴位各2.5分钟。30分钟后用戊巴比妥钠腹腔注射并维持麻醉状态,行脑部PET-CT扫描。尾静脉注射显影剂时间根据针刺降压起效时间定,从尾静脉注射18F-FDG显影剂。空白组、模型组大鼠只进行抓取,不予针刺操作,其余操作同针刺组。疗程后PET-CT扫描:针刺疗程(7天)结束后,对各组大鼠进行PET-CT扫描,在注射显影剂及PET-CT扫描整个过程中,不予针刺干预。PET采集图像采用SPM8进行图像和数据分析,由中国科学院高能物理研究所完成。研究结果:各组大鼠的体重及原始血压的情况:(1).针刺治疗前,观察各组大鼠血压的情况。针刺太溪组、针刺非穴组、模型组与正常血压WKY组比较具有显著差异,(p<0.05),有统计学意义,说明各组大鼠的血压均比WKY组大鼠血压偏高,提示模型组大鼠血压与WKY组大鼠血压具有可比性。针刺太溪组、针刺非穴组、模型组组间比较(p>0.05),说明无统计学意义,提示针刺前所有SHR大鼠血压数值无显著差异,各组大鼠血压值具有良好的齐同对比性。(2).针刺即刻,针刺后10min开始进行血压测量,观察研究针刺降压的时效性。如图3、4示,对比正常血压WKY大鼠组,模型组大鼠的血压在30、60、90min时较高,组间血压进行比较,差异性有统计学意义(p<0.05),这提示对比正常WKY大鼠,模型大鼠血压更高,模型动物血压与正常大鼠血压具有可比性。经过一次针刺太溪穴之后,结果可见在针刺后30、60min时,针刺太溪穴组大鼠的收缩压和舒张压均低于模型组大鼠血压,差异性有统计学意义(p<0.05),且30min时血压值最低,低于其他时间点血压数值,随后血压随时间上升,这提示即刻针刺太溪穴后,针刺能降低大鼠收缩压和舒张压,降压效果较为明显,并且在针刺一次太溪穴之后30min的降压作用最明显。经过一次针刺非穴后,结果可见在针刺后30、60、90min,针刺非穴组血压与模型组大鼠血压相比,收缩压和舒张压均没有明显的降低,差异无统计学意义(p>0.05),这提示即刻针刺非穴后,降压作用不明显。与针刺非穴组大鼠相比,在30、60min时,针刺太溪穴组大鼠的收缩压和舒张压均低于非穴组大鼠血压,差异具有统计学意义(p<0.05),结果说明经针刺1次后,针刺太溪穴组大鼠的降压效果比针刺非穴组大鼠的降压效果明显。(3).针刺疗程后,针刺后24h开始测量血压,连续测量3天。观察研究针刺后降压的时效性。如图5、6示,与正常组血压WKY大鼠相比,在疗程后24、48、72h时模型组大鼠的收缩压和舒张压较高,差异有统计学意义(p<0.05),这提示疗程后模型组大鼠血压较正常组WKY大鼠血压更高,结果说明正常大鼠的血压和高血压动物模型的血压之间具有可比性。针刺高血压大鼠的太溪穴一个疗程后(7次),结果显示在疗程后24、48h,针刺太溪穴组大鼠的收缩压和舒张压均低于模型组大鼠血压,差异有统计学意义(p<0.05),且24h时血压最低,低于其他时间点血压数值,随后血压随时间上升,这提示针刺太溪穴疗程后,针刺能降低大鼠收缩压和舒张压,降压效果较为明显,并且在针刺太溪穴疗程之后24h的降压作用最明显。经过一个疗程针刺非穴后,结果可见在疗程后24、48、72h,针刺非穴组血压与模型组大鼠血压相比,收缩压和舒张压均没有明显的降低,差异无统计学意义(p>0.05),这提示针刺非穴疗程后,降压作用不明显。与针刺非穴组大鼠相比,在24、48h时,针刺太溪穴组大鼠的收缩压和舒张压均低于非穴组大鼠血压,差异具有统计学意义(p<0.05),结果说明经针刺一个疗程后,针刺太溪穴组大鼠的降压效果比针刺非穴组大鼠的降压效果明显。2.SHR模型组大鼠与WKY对照组大鼠对比葡萄糖代谢改变的脑区:疗程第1天时,SHR模型组大鼠与WKY对照组大鼠比较,部分脑区的功能被激活,其葡萄糖代谢量发生改变。葡萄糖代谢减少的脑区主要集中于:视觉皮质、感觉皮层、运动皮层。葡萄糖代谢增加的脑区主要集中于:下边缘皮层、丘脑、腹侧眶皮层、背侧丘脑_外侧核团、背侧丘脑、眼眶皮层、下丘脑。疗程第8天时,SHR模型组大鼠与WKY对照组大鼠比较,部分脑区的功能被激活,其葡萄糖代谢量发生改变。葡萄糖代谢减少的脑区主要集中于:尾状核、基底神经节、胼胝体、扣带回、扣带皮层、运动皮层、感觉皮层、视觉皮质。葡萄糖代谢增加的脑区主要集中于:小脑前叶、下边缘皮层、丘脑、腹侧眶皮层、背侧丘脑_外侧核团、背侧丘脑、眼眶皮层。3.针刺太溪组大鼠与SHR模型组大鼠对比葡萄糖代谢改变的脑区:疗程第1天时,针刺太溪组大鼠与SHR模型组大鼠比较,部分脑区的功能被激活,其葡萄糖代谢量发生改变。葡萄糖代谢减少的脑区主要集中于:前嗅核、伏核、下丘脑、丘脑、前额叶皮层、嗅球、前连合、背侧丘脑_外侧核团、背侧丘脑、下丘脑管区、隔区周围核、眼眶皮层、纹状体。葡萄糖代谢增加的脑区主要集中于:小脑后叶、视觉皮层。疗程第8天时,针刺太溪组大鼠与SHR模型组大鼠比较,部分脑区的功能被激活,其葡萄糖代谢量发生改变。葡萄糖代谢减少的脑区主要集中于:床核、丘脑、内囊、隔区周围核、纹状体。葡萄糖代谢增加的脑区主要集中于:下脚、嗅觉皮层。4.针刺太溪组大鼠与针刺非穴组大鼠对比葡萄糖代谢改变的脑区:疗程第1天时,针刺太溪组大鼠与针刺非穴组大鼠比较,部分脑区的功能被激活,其葡萄糖代谢量发生改变。葡萄糖代谢减少的脑区主要集中于:无颗粒岛皮层、岛叶皮层、延髓、脑桥桥梁。葡萄糖代谢增加的脑区主要集中于:下脚、海马、海马伞。疗程第8天时,针刺太溪组大鼠与针刺非穴组大鼠比较,部分脑区的功能被激活,其葡萄糖代谢量发生改变。葡萄糖代谢减少的脑区主要集中于:丘脑、延髓、脑桥桥梁。葡萄糖代谢增加的脑区主要集中于:前嗅核、基底神经节、尾状核、嗅球、前额叶皮层、胼胝体、小脑后叶、眼眶皮层、梨状皮质、纹状体。研究结论:1.针刺太溪穴对SHR具有确切降压效果,非穴没有降压效果。针刺SHR太溪穴即刻后,30min收缩压和舒张压的降压效果最佳,优于60、90min。疗程后,24h收缩压和舒张压的降压效果更好,优于48、72h,说明针刺太溪穴的近期降压效应明显。2.针刺即刻后PET-CT成像示:与正常WKY组大鼠相比,针刺太溪穴可以降低SHR的下丘脑、丘脑、背侧丘脑等区域异常升高的葡萄糖代谢;与非穴组相比,针刺太溪穴可以降低延髓的葡萄糖代谢;提示下丘脑、丘脑、背侧丘脑及延髓可能在针刺太溪的瞬时降压效应中发挥关键作用。针刺疗程后PET-CT成像示:与正常WKY组大鼠相比,针刺太溪穴可降低SHR丘脑中异常升高的葡萄糖代谢;与非穴组相比,针刺太溪穴可以降低延髓中的葡萄糖代谢;提示丘脑和延髓可能在针刺太溪的长期降压效应中发挥重要作用。可见,针刺疗程后效应与针刺即刻效应的调控方向一致。针刺选穴不同,降压效果不同,且脑区成像不同,从客观上体现经穴特异性,经穴-脑相关学说。针刺即刻和针刺疗程后PET-CT成像示:与正常WKY组大鼠相比,SHR组前后葡萄糖代谢降低的相同区域:运动皮层、感觉皮层和视觉皮层;与SHR组相比,针刺太溪组前后葡萄糖代谢降低的相同区域:丘脑、隔区周围核和纹状体;与非穴相比,针刺太溪组前后葡萄糖代谢降低的相同区域:延髓和脑桥桥梁。前后存在葡萄糖代谢降低的相同区域,这些区域可能在即刻和疗程后都有降压效应,其中可能存在新的降压关键脑区,有待下一步研究。