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我国是百合野生资源最丰富的国家。本文利用我国野生百合资源,开展百合野生种及栽培品种种间杂交亲和性及杂种胚离体培养的研究,完成了从杂交到培育出杂种实生苗的全过程。具体结果如下:
对百合野生种渥丹、毛百合、细叶百合、兰州百合、垂花百合、卷丹、及亚洲百合杂交系品种布鲁拉诺、东方百合杂交系品种索蚌和麝香百合系品种罗瑞拉的种间杂交亲和性进行了研究,通过调查蒴果的膨大程度和有胚率,初步判断其种间杂交亲和性,结果表明,以布鲁拉诺为母本的杂交组合的S值普遍高于其它杂交组合,杂交亲和性较好的杂交组合有布鲁拉诺×渥丹、布鲁拉诺×毛百合、布鲁拉诺×兰州百合、布鲁拉诺×细叶百合、毛百合×布鲁拉诺、毛百合×渥丹、毛百合×细叶百合、垂花百合×细叶百合,S值最高的达到85.7%,杂交亲和性很差的杂交组合有兰州百合×卷丹和罗瑞拉×渥丹,两组合均没有得到半膨大以上的蒴果,S值为0。对于大多数杂交组合,蒴果的膨大程度和有胚率所表示的结论基本一致。
采用6种授粉方法,研究不同授粉方法在不同杂交组合中的作用发现,对于花柱较长且粗的百合种(如布鲁拉诺、毛百合)切花柱的授粉方法大多能提高蒴果的膨大程度,在切花柱的基础上结合其它如重复授粉、提前授粉的方法,更有利于种间杂交的结实;而对于花柱长且细的百合种(如兰州百合),切花柱的授粉方法反而降低蒴果膨大程度,不同授粉方法之间差别不大,但延迟授粉法得到了较多半膨大以上蒴果,在以兰州百合为母本时可选用延迟授粉法;对于花柱较短的百合种(如渥丹),是否切花柱对其蒴果的膨大程度没有明显的影响。因此,提前授粉与重复授粉在种间杂交中取得较好的效果,而切花柱和延迟授粉的效果依不同百合种而不同,施用生长素(NAA)并没有提高百合蒴果的膨大程度,可能与施用浓度有一定的关系。并且通过测量不同授粉方法的部分杂交组合后所得蒴果及对宽/长值进行显著性分析,其结果一致。
通过对授粉后不同时间的百合母本花柱进行采样,观察花粉管的生长情况,分析百合种间杂交和自交中亲和及不亲和的原因,对于杂交组合布鲁拉诺×兰州百合,无论是否进行切割花柱处理,均可观察到大量的花粉萌发现象和成束向子房方向生长的花粉管,在授粉后48h花粉管大约生长1.5cm;卷丹自交后,花粉粒的萌发较晚,且数量较少,在授粉后48h观察到花粉管生长停滞的现象。
以不同百合种间杂交获得的幼胚作为外植体进行离体胚培养,观察不同百合种间杂种胚的萌发和生长情况,筛选出适合百合种间杂种胚萌发、增殖和生根的培养基。结果表明,大部分杂种胚均能正常萌发,而在激素浓度BA0.1mg/L,NAA0-0.02mg/L的条件下,NAA浓度的变化对幼胚的萌发没有明显影响,在所有的杂交组合中,渥丹×卷丹的萌发率最高,达到96.1%。对所得百合杂种幼苗进行继代培养筛选出最适的增殖培养基为MS+NAA0.01mg/L+BA0.5-0.75mg/L。在生根实验中发现,添加活性炭的培养基中幼苗生根良好,最适生根培养基为1/2MS+0.1%活性炭。对已生根的百合杂种幼苗进行扦插及移栽,扦插成活率均在90%以上,移栽成活率约在50%以下。