人前列腺癌靶向超声造影剂的制备及实验研究

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背景: 前列腺癌(PCa)是西方国家最常见的恶性肿瘤之一,是美国男性癌症死亡的第二大原因。近年来,我国前列腺癌的发病率也急剧上升。前列腺癌患者出现临床症状就诊时多已发生转移,失去了治愈的机会,因此早期诊断对前列腺癌的治疗与预后有重要的价值。目前所有的影像学检查,都不能敏感地区分慢性前列腺炎、前列腺肥大与早期前列腺癌,其早期定性定位诊断仍然非常困难,仍依赖于有创的前列腺多点穿刺活检。超声造影剂及相关技术的发展使人们对超声造影在诊断前列腺肿瘤中的作用有了更进一步地了解,但目前用于前列腺肿瘤研究的超声造影剂是一种无定向选择作用的全身性造影剂。研究发现,前列腺特异性膜抗原(PSMA)是位于前列腺细胞膜上的一种糖蛋白,具有很高的前列腺组织特异性,在前列腺癌组织中呈明显高表达。血管内皮生长因子(VEGF)在前列腺癌组织中分布广泛,在前列腺肿瘤新生血管的生成和维持方面具有重要作用。基于上述研究成果,我们设想分别以抗PSMA 抗体和抗VEGF 抗体为导向载体,制备人前列腺癌靶向超声造影剂并将其应用于动物实验,则可使携带抗体的靶向造影剂能以较高的浓度聚集在荷瘤裸鼠前列腺肿瘤组织,达到特异性显影的目的。目的: 分别以PSMA 抗体或VEGF 抗体作为配体,制备人前列腺癌靶向超声造影剂,探讨其体外寻靶能力;并探讨该造影剂对荷人前列腺癌裸鼠的特异增强显像效果,以期建立敏感的实验性前列腺癌超声早期诊断方法。方法: 采用静电吸附法将PSMA 抗体和VEGF 抗体分别与微泡造影剂结合,制备人前列腺癌靶向超声造影剂;免疫荧光染色实验证明抗体与微泡的结合以及PSMA 蛋白在人前列腺癌细胞LNCaP 和VEGF 蛋白在血管内皮细胞ECV304 上的表达;靶向结合实验探讨靶向微泡的体外寻靶能力,以普通微泡作为对照;抗体阻断实验检测靶向微泡在体外与靶细胞结合的特异性。人前列腺癌细胞株LNCaP 体外无菌条件下培养传代,BALB/c-nu 雄性裸鼠皮下接种,建立荷人前列腺癌裸鼠动物模型。经荷瘤裸鼠尾静脉分别推注普通造影剂、携带
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