CIT在胆管癌组织中的表达及其与胆管癌增殖功能关系的研究

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目的探讨CIT作为fascin调控胆管癌发生发展的下游基因,其与胆管癌增殖功能的关系。方法RT-PCR对CIT基因在临床样本组织中的表达进行检测;慢病毒的制备及转染,将目的细胞分为感染过阴性对照病毒的胆管癌RBE细胞组与感染加RNAi靶点病毒的胆管癌RBE细胞组,RT-PCR检测CIT基因在mRNA水平的敲检效率;分别对转染靶细胞与阴性对照细胞进行增殖细胞计数并分析有无差异,确定CIT基因对细胞增殖功能的影响。结果1、RT-PCR检测10临床新鲜胆管癌组织及其癌旁组织发现,CIT在癌组织中表达较癌旁组织高;2、慢病毒制备并转染RBE细胞成功,RT-PCR对mRNA水平的CIT基因进行敲检,结果提示实验组RBE细胞中CIT基因在mRNA水平的表达量受到抑制,p值为3.60085E-03,p<0.05,有统计学意义,基因敲检成功;3、RT-PCR检测发现,转染靶细胞相比阴性对照组细胞,细胞增殖显著减缓,增殖抑制倍数为3.73,p值<0.05,有统计学意义。结论1、CIT在胆管癌组织中表达较癌旁组织高;2、慢病毒干扰成功敲除CIT在胆管癌RBE细胞株的表达;3、CIT基因敲除后RBE胆管癌细胞增殖受抑。
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