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前言 外伤或手术引起周围神经缺损的临床修复一直是外科领域里尚未解决的疑难问题之一。当神经缺损无法以直接手术缝合时，就需借助神经移植体的引导，使周围神经缺损获得神经再生的成功。长期以来，自体神经移植修复神经缺损是主要解决方法，然而自体神经移植体来源困难；由此曾进行了大量异体神经移植的实验研究，虽不断有新的进展，但其抗原性及免疫排斥反应问题，迄今依然没有突破性进展；近来国内外学者研究认为肌桥能诱导神经再生，但再生效果尚不能在临床推广应用，究其原因固然较多，但是结缔组织增生快于神经再生，可能是其中一个关键的因素，为此本实验试图用能促进雪旺氏细胞分裂增殖和轴突生长的bFGF及能降低参与成纤维细胞合成胶原纤维的维生素C浓度的试剂，制成的bFGF复合降解膜，一方面增强神经再生能力，另一方面减轻或抑制结缔组织增生干扰，从而提高肌桥神经再生效果。 实验材料与方法 实验材料 1．实验动物：由中国医科大学实验动物饲养中心选购健康、雌雄兼有、体重2500～3000g大耳白兔32只。 2．主要试剂：bFGF复合降解膜：由中国科学院成都有机化学研究所协制 3．主要仪器： (1)图象分析仪：Leca DMLB(国产) (2)电镜：H—7100日立电镜(日本产) (3)光镜：Olympus光学显微镜(日本产) (4)肌电图仪(丹麦产) 实验方法 1．用32只兔左、右肢正中神经64条，分别切除2.5cm神经段，缝匠肌桥接神经缺损为实验材料。分两组:A组在桥接部位包裹bFGF复合降解膜为实验组，B组不包膜为对照组。术后不同时间，切取神经桥接部位，常规制成光、电镜组织学标本和图像分析仪、Hyp含量以及粘连定量、电生理等指标测定。 2.统计学方法:应用STATISTICA 5 .0软件行T检验，方差分析。实验结果 1.肉眼观察:术后不同时期的A组神经肌肉桥接段的远、近端缝合处的梭形膨大明显较B组的小，肌桥段的神经较B组的粗和光滑，缝合段与肌桥段神经同其外周相连的结缔组织明显较B组的少。 2.镜下观察:术后Zld，可见A组远、近端缝合段内的结缔组织和缝合段及肌桥段同其外周相连接的结缔组织均明显较B组少，肌桥段残存的肌纤维明显较B组少，随术后时间(56d、90d和180d)推移，上述A组与B组的结构差异，不但更趋于明显，而且A组肌桥段和神经远段内的有髓神经纤维，在数量和直径上均明显较B组的多和粗。在电镜下，可见A组神经远段的有髓神经纤维较其神经近段的细，髓鞘薄，板层不够清楚，着色较淡。对比两组:A组的再生有髓神经纤维明显较B组的髓鞘厚，板层较清楚和着色深，粗有髓纤维较多。 3.玩ica图像分析仪测定术后180d各组神经近段与神经远段的有髓神经纤维数量测定表明:A组再生的有髓神经纤维明显较B组多(P<0.001)表明bFGF复合降解膜有提高神经再生的作用;术后180d各组有髓神经纤维直径的测定表明，A组再生的有髓神经纤维平均直径与B组存在显著性差异(P<0.05)，A组的有髓神经纤维的发育程度好于B组，提出bF-GF复合降解膜有促进神经纤维发育成熟的作用。 4.神经与外周粘连定量测定:术后90d各组神经近端缝合段与外周粘连定量测定显示:A组神经近端缝合段与外周粘连程度明显较B组轻，其结果有显著性差异(P<0.01)。 5.经脯氨酸(Hyp)含量测定:术后3个月近端神经肌桥缝合段的脚p含量测定结果显示:A组近端神经肌桥缝合段HyP含量明显较B组的低，且有显著差异(P<0.01)。 6.电生理指标:术后1 80d屈腕肌肌电的测定显示:(l)A组潜伏期较B组短(P<0.01)，表明A组神经传导较B组快。(2)A组波幅明显较B组高(P<0.05)，说明A组神经再生效果好。讨论 研究证明，骨骼肌桥接神经缺损，均能获得神经再生，迄今存在的主要问题是到达靶器官的再生神经纤维在数量上和质量上的差异较大，究其原因固然较多，但结缔组织增生快于神经再生，可能是其中重要因素。 众所周知，周围神经损伤后的修复是神经元，神经损伤局部和靶器官三个水平的恢复过程。研究证明bFGF有保护神经元免受损伤，促进神经元成活和轴突生长的作用。当周围神经损伤后，伤区的bFGF可能由于细胞受损或死亡释放而增多，bFGF与神经末梢受体结合经逆行运输至胞体;外源性bFGF可通过防止或抑制细胞Ca浓度升高，抑制损伤后反应性氧自由基的增高，达到阻止神经的逆行性和顺行性溃变，保护受损神经元免于死亡，促进轴突再生作用。另外大量实验证明，bFGF在周围神经损伤局部能促进雪旺氏细胞分裂增殖，由于雪旺氏细胞增多，神经溃变产物被雪旺氏细胞较快吞噬清除，并迅速形成Bunger’s带，再生轴突沿Bunger’s带向远端延伸，不再受结缔组织增生干扰。此外周围神经再生时，具有保护神经元和促进轴突再生作用的神经营养因子主要来源于雪旺氏细胞〔”〕，雪旺氏细胞数量增多无疑会产生大量的神经营养因子，而后者对神经元恢复和再生轴突成熟，定向和重建终末突触等会又有促进作用。由此本实验试图用bFGF来增强神经自身再生能力。