茯砖茶多糖提取方法及调脂保肝作用研究

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茯砖茶隶属我国六大茶类中的黑茶类产品,茶砖砖面平整,汤色橙红,滋味醇厚有菌花香,具有减肥,降血糖,降血脂等多种功效。茶多糖是一种具有生理活性的复合植物多糖,也是构成茯砖茶重要的功能成分之一。非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前世界上最常见的几种肝病之一,其患病率和死亡率一直呈现快速增长的趋势。近年来已有很多研究表明茯砖茶水提物具有调脂保肝作用,但是较少有关于茯砖茶多糖调脂保肝作用的研究报道,而且茯砖茶多糖的提取工艺还有待进一步完善。基于此,本论文以湖南茯砖茶为原料,横向比较了不同茯砖茶提取方法,并以最适方法提取的茯砖茶多糖作为研究材料,探讨茯砖茶多糖对非酒精性脂肪肝大鼠的调脂保肝作用,从而为黑茶消费热的兴起、茶叶资源的高值化利用以及NAFLD相关疾病的防治型药物开发提供科学基础。主要的研究结果如下:1、茯砖茶多糖提取方法比较首先比较热水浸提、超声波辅助提取、微波辅助提取、酶辅助提取以及超声-酶辅助提取、微波-酶辅助提取和超声-微波辅助提取法这7种方法所提取的茯砖茶茶汤中多糖的含量,发现超声-酶辅助提取的茯砖茶茶汤中多糖含量最高,可达17.37%,是传统热水浸提法3.77%的4.6倍。然后基于筛选的超声-酶辅助提取法,并选择热水浸提法,超声波辅助提取法、酶辅助提取法作为对照方法,对茯砖茶多糖进行进一步分离纯化,比较纯化后茶多糖样品的产率和主要组分含量。结果指出,使用超声-酶辅助提取法提取的茶多糖产率是最高的,分别是热水浸提的2.26倍,超声波提取的2.03倍,酶辅助提取法的1.1倍;中性糖和糖醛酸含量也是最高的,分别为42.54%和36.88%,总体可溶性多糖达79%,糖醛酸高含量也说明茯砖茶多糖是典型的酸性多糖。综合以上,最终确定超声-酶辅助提取法为提取茶多糖的最佳方法,并以此提取茯砖茶多糖进行后续研究。2、茯砖茶多糖对非酒精性脂肪肝大鼠的调脂保肝作用经过56天的高脂诱导NAFLD大鼠模型和茯砖茶多糖干预后,通过检测大鼠体重、体脂率、血脂水平、肝脏抗氧化指标以及肝脏和脂肪组织病理切片,探讨了茯砖茶多糖对非酒精性脂肪肝大鼠的调脂保肝作用。结果表明,与模型组相比,茯砖茶多糖保护组大鼠的体重和体脂率有极显著的下降,血清TG、TC、LDL-C值极显著地下降,HDL-C值则极显著提高(p<0.01)。与模型组相比,茯砖茶多糖保护组大鼠肝脏体积变小,颜色变红润。H&E染色结果表明,茯砖茶多糖保护组大鼠肝脏中脂肪空泡减少,浮肿、炎症侵润现象好转,且低、高剂量组均能显著改善脂肪细胞病变现象并能够减少脂肪细胞尺寸。肝功能和肝脏氧化指标对比结果显示,茯砖茶多糖保护组大鼠血液中AST、ALT水平和肝脏MDA含量均低于高脂模型组,说明茯砖茶多糖具有一定的改善肝脏受损的作用。综上,茯砖茶多糖可以减轻大鼠的体重,减少肝脏脂肪的聚积,调节大鼠肝脏的脂质代谢并且改善高脂饮食对大鼠肝脏的损害,保护肝脏功能。
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