油茶饼粕多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性研究

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油茶(Camellia oleifera Abel),是山茶科、山茶属的多年生木本油料作物,我国特有的木本油料物种。油茶饼粕为油茶籽仁榨油后的残余物,含有30%-60%的糖类物质。多糖具有降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗感染、治疗艾滋病等多方面的生物活性。因此,对油茶饼粕中多糖进行提取、分离纯化以及抗氧化性研究具有十分重要的意义。本论文以产自湖南浏阳的油茶饼粕为原料,对其中的茶皂素和活性多糖的提取工艺进行了研究;活性炭对油茶饼粕多糖(Camellia Oleifera Polysaccharide,简称COP)进行了脱色处理;SephadexG-100葡聚糖凝胶层析柱对油茶饼粕多糖进行了初步分离,用高效液相色谱对油茶饼粕多糖的纯度进行了鉴定;运用紫外可见分光光度计分析、红外光谱分析等方法对多糖的结构进行了初步研究;并研究了油茶饼粕多糖的体外抗氧化活性。本文的主要研究内容及结果如下:1.以乙醇为提取溶剂,提取油茶饼粕中的茶皂素。实验得出最佳工艺条件为:乙醇浓度80%、料液比1:9(g/mL)、提取时间4h、提取温度90℃,茶皂素在此条件下的提取率为8.98%。2.研究了油茶饼粕多糖的水提工艺,探讨了提取温度、料液比、提取时间对多糖提取率的影响。在单因素实验的基础上,通过正交试验优化了其最佳提取工艺条件。结果表明,提取油茶饼粕多糖的最佳工艺条件为:提取温度70℃、料液比1:30(g/mL)、提取时间4h,油茶饼粕多糖在此条件下的提取率可达到5.88%。3.采用活性炭对油茶饼粕多糖进行了脱色处理。采用单因素和正交实验,确定了多糖脱色的最佳工艺参数:活性炭用量为0.2g/l00mL、脱色温度为60℃、脱色时间为1.5h,能达到较好的脱色效果。此条件下,脱色率为81.66%,多糖保留率为82.11%。SephadexG-100葡聚糖凝胶柱层析对多糖进行了分离,蒸馏水洗脱得到了两个多糖组分COP1和COP2。高效凝胶色谱对多糖组分COP1和COP2进行了纯度鉴定,结果显示两组份均为纯品。紫外检测显示多糖在260nm和280nm无核酸和蛋白特征吸收峰。红外检测显示油茶饼粕多糖具有多糖类物质的特征吸收峰。4.通过四种不同的体系(DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基、还原能力)研究了油茶饼粕多糖的体外抗氧化活性,并与VC的抗氧化性进行了对照。结果表明,油茶饼粕多糖具有一定的抗氧化活性,且其抗氧化能力随着浓度的增加而相应增加。油茶饼粕多糖清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的IC50分别为9.449mg/mL、0.989mg/mL、3.5mg/mL,并具有较高的还原能力,但作用效果都与VC存在一定的差距。
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