目的:从中药功劳木提取物中筛选具有抗肿瘤作用的活性成分,并探讨活性成分的抗肿瘤作用机制。方法:采用MTT(3- (4,5 - Dimethythiazol-2-y l) - 2,5- diphenyl- te-trazolium bromide)法检测功劳木提取物对人白血病K562细胞的增殖抑制作用,筛选抗肿瘤活性成分。通过吖啶橙/溴乙啶(Acridine orange /Ethidium BromideAO/EB)双染法观察细胞形态学变化,罗丹明123(Rhodamine,Rh123)/Hoechst33342检测细胞线粒体膜电位的变化,采用DCFH-DA/Hoechst33342荧光法结合高内涵活细胞成像系统检测细胞内氧自由基水平,以检测功劳木活性成分K562细胞凋亡的影响。提取兔脑微管蛋白采用比浊发检测功劳木活性成分对微管蛋白聚合-解聚的影响。结果:从功劳木提取物中筛选出两种抗肿瘤活性成分,分别为药根碱和小檗碱,其对K562细胞作用48h的IC50分别为30.47μg/ml,15.36μg/ml。药根碱、小檗碱作用K562细胞36h后,在形态学上呈现明显的细胞凋亡特征,且细胞内氧自由基水平明显增加,细胞内线粒体膜电位明显降低,均呈浓度依赖性。体外兔脑微管蛋白聚合-解聚分析表明,药根碱和小檗碱均能抑制微管蛋白的聚合,且药根碱作用强于小檗碱。结论:从功劳木中提取的药根碱和小檗碱对K562细胞生长具有明显的增殖抑制作用并可诱导其凋亡。药根碱和小檗碱可能通过阻碍线粒体内信号传导通路或抑制微管蛋白的聚合诱导细胞凋亡。