【摘 要】
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目的:观察吴门医派经验方（苏州市中医医院院内制剂）蠲痹通络口服液对糖尿病周围神经病变患者的临床疗效,研究其对血管内皮细胞多因素损伤及人神经母细胞瘤细胞氧化损伤的保护作用。方法:1.临床研究随机选取符合纳入标准的气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者60例,依据随机对照的原则分为中药治疗组和对照组,每组各30例。对照组予基础治疗和口服依帕司他片、甲钴胺片,中药治疗组在对照组的基础上加予口服蠲痹通络口服液,
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目的:观察吴门医派经验方（苏州市中医医院院内制剂）蠲痹通络口服液对糖尿病周围神经病变患者的临床疗效,研究其对血管内皮细胞多因素损伤及人神经母细胞瘤细胞氧化损伤的保护作用。方法:1.临床研究随机选取符合纳入标准的气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者60例,依据随机对照的原则分为中药治疗组和对照组,每组各30例。对照组予基础治疗和口服依帕司他片、甲钴胺片,中药治疗组在对照组的基础上加予口服蠲痹通络口服液,两组均治疗12周。观察两组治疗前后血糖、血脂、凝血相关指标、中医证候积分、多伦多临床（TCSS）评分的变化情况。2.细胞实验2.1蠲痹通络口服液对血管内皮细胞（HUVEC）多因素损伤的保护作用30只模型大鼠随机分为空白对照组和蠲痹通络口服液给药组,分别灌胃生理盐水和蠲痹通络口服液制成空白血清与含药血清。MTT法先明确合适的过氧化氢（H202）、葡萄糖损伤HUVEC的作用浓度,再检测损伤后各组细胞的存活率以探究不同浓度蠲痹通络含药血清对血管内皮细胞氧化损伤、高糖损伤的保护作用。TUNEL法检测各组高糖损伤HUVEC的凋亡情况,Western Blotting法检测凋亡相关蛋白的表达情况。2.2蠲痹通络口服液对人神经母细胞瘤细胞（SHSY5Y）氧化损伤的保护作用同前实验方法制备空白血清和含药血清。MTT法先明确合适的H2O2损伤SHSY5Y的作用浓度,再检测损伤后各组细胞的存活率以探究不同浓度蠲痹通络含药血清对SHSY5Y细胞氧化损伤的保护作用。TUNEL法检测SHSY5Y在H202损伤条件下的凋亡情况,Western Blotting法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:1.临床研究结果血糖相关指标:两组治疗前后均有显著差异（P＜0.01）:组间对比,中药治疗组治疗后的空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）指标改善程度优于对照组（P＜0.05）;中药治疗组的餐后两小时血糖（2hPG）治疗效果明显优于对照组（P＜0.01）。血脂相关指标:组内对比,中药治疗组治疗前后除高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）无差异,其余均明显改善（P＜0.01）,对照组治疗后低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）指标优于治疗前（P＜0.01）,总胆固醇（TC）较治疗前有所改善（P＜0.05）;组间对比,中药治疗组TC的下降程度优于对照组（P＜0.05）。凝血相关指标:中药治疗组较治疗前明显改善（P＜0.01）,对照组除部分凝血活酶时间（APTT）外,其余指标改善较治疗前差异显著（P＜0.01）;组间对比,中药治疗组的APTT、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）改善优于对照组,（P＜0.01）。中医证候积分:中药治疗组和对照组患者的中医证候积分较治疗前显著下降（P＜0.01）;组间比较,中药治疗组的治疗效果明显优于对照组（P＜0.01）。TCSS评分:两组治疗后TCSS评分较治疗前均明显降低（P＜0.01）;组间比较,中药治疗组的积分下降程度优于对照组（P＜0.05）。中医证候疗效:中药治疗组患者的治疗总有效率为90.00%,对照组患者的治疗总有效率63.33%,中药治疗组的中医证候疗效优于对照组（P＜0.05）。疾病疗效:中药治疗组患者的临床总有效率为90.00%,对照组患者的临床总有效率为56.67%,中药治疗组疾病疗效优于对照组（P＜0.05）。2.细胞实验结果蠲痹通络含药血清具有对抗HUVEC细胞氧化损伤、高糖损伤的作用趋势（与模型组相比,P＜0.05）;TUNEL法检测发现给以不同浓度的蠲痹通络含药血清后,凋亡小体的绿色荧光显著减弱,以高浓度的效应最强。WB法检测发现给以蠲痹通络含药血清后,凋亡相关蛋白的表达显著下降（与模型组相比,P＜0.05）,其中浓度为3%时下降趋势最强。蠲痹通络含药血清具有对抗SHSY5Y细胞氧化损伤的作用趋势（与模型组相比,P＜0.05）;TUNEL法检测发现给以不同浓度的蠲痹通络含药血清后,凋亡小体的绿色荧光显著减弱,以高浓度的效应最强。WB法检测发现给以蠲痹通络含药血清后,凋亡相关蛋白的表达显著下降（与模型组相比,P＜0.05）,其中高浓度的下降趋势最强。结论:蠲痹通络口服液能改善患者的症状体征,调节其糖脂代谢,降低血液粘稠度。细胞实验表明蠲痹通络口服液能改善血管内皮功能、改善血液流变学以减轻缺血性神经细胞损伤,并抗氧化应激修复神经损伤。
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