【摘 要】
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研究目的:探究ITGB1/FAK/AKT通路在神经调节蛋白-1(NRG-1)促进Ⅰ型糖尿病大鼠背根神经节神经元轴突生长中的作用,明确轴突再生的机制,为改善糖尿病患者晚期神经病变感觉减退提供理论支持。实验方法:取180-210 g左右的成年雄性SD大鼠,使用链脲佐菌素(STZ)诱导出Ⅰ糖尿病;诱导成功八周后,按照Goldenberg SS等人方法提取大鼠脊髓背根神经节神经元细胞,采用Tubulin-
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研究目的:探究ITGB1/FAK/AKT通路在神经调节蛋白-1(NRG-1)促进Ⅰ型糖尿病大鼠背根神经节神经元轴突生长中的作用,明确轴突再生的机制,为改善糖尿病患者晚期神经病变感觉减退提供理论支持。实验方法:取180-210 g左右的成年雄性SD大鼠,使用链脲佐菌素(STZ)诱导出Ⅰ糖尿病;诱导成功八周后,按照Goldenberg SS等人方法提取大鼠脊髓背根神经节神经元细胞,采用Tubulin-βⅢ特异性荧光染色对所得神经元细胞进行鉴定。通过蛋白定量及轴突长度分析明确NRG-1对糖尿病大鼠神经元生长的促进作用,并采用RT-qPCR及western blot手段分析ITGB1/FAK/AKT信号通路在NRG-1处理前后的表达变化情况,最后设计ITGB1特异性siRNA阻断上述通路,从而明确该通路在NRG-1促进Ⅰ型糖尿病大鼠背根神经节神经元轴突生长中的作用。实验结果:通过血糖、体重测定等方法,证实本研究中Ⅰ型糖尿病大鼠诱导成功。Tubulin-βⅢ荧光染色表明所得细胞是神经元细胞,且纯度在90%以上。RT-qPCR及western blot结果表明,与正常大鼠相比,糖尿病大鼠中ITGB1/FAK/AKT通路表达显著降低,而NRG-1的加入能够显著促进轴突生长,并上调该通路,且使用siRNA阻断该通路后,NRG-1的促轴突生长作用被部分逆转。结论:NRG-1能够促进Ⅰ型糖尿病大鼠背根神经节神经元轴突的生长,且ITGB1/FAK/AKT通路在此过程中发挥了关键作用。
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