【摘 要】
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由麦根腐离蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana）引起的小麦根腐病是一种真菌性病害,对小麦植株的各组织都会造成损伤,特别是在低温、干旱的地块尤为严重,防治困难,农户通常选用化学农药防治。虽然化学农药见效快,但过度使用会使病原菌产生耐药性,并破坏土壤环境,限制了化学农药的发展。而安全的生物防治越来越受到人们青睐。因此在自然环境中寻找有效的生防菌株,是防治植物病害并减少经济损失的有效途径。
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由麦根腐离蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana）引起的小麦根腐病是一种真菌性病害,对小麦植株的各组织都会造成损伤,特别是在低温、干旱的地块尤为严重,防治困难,农户通常选用化学农药防治。虽然化学农药见效快,但过度使用会使病原菌产生耐药性,并破坏土壤环境,限制了化学农药的发展。而安全的生物防治越来越受到人们青睐。因此在自然环境中寻找有效的生防菌株,是防治植物病害并减少经济损失的有效途径。本研究以小麦根际土壤为分离源,进行放线菌的分离纯化,以麦根腐离蠕孢菌（B.sorokiniana）为供试病原菌,对获得的菌株进行体外抗菌活性测试,筛选出一株活性较强的放线菌NEAU-BS7,通过盆栽试验验证菌株NEAU-BS7的防效。对菌株进行固体发酵及条件优化、液体发酵和全基因组预测分析。主要实验结果如下:（1）利用5种筛选培养基（GS、DPA、CPA、SSA和AAG）对小麦根际土壤进行放线菌的分离、纯化,整合后共获得113株放线菌,其中放线菌NEAU-BS7对小麦根腐病病原菌抑制作用最好,达到75.0%。（2）广谱抑菌活性测试表明菌株NEAU-BS7对9种供试真菌都有一定的抑制作用,其中抑制率达到45%以上的有黄瓜棒孢病菌（Corynespora cassiicola）和黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum）等,达到70%以上的有菜花黑斑病菌（Diplocarpon rosae）。（3）小麦盆栽实验显示,当土壤中活性菌孢子浓度为10~8CFU/g时,防效达到72.7%。病情指数从88.0下降至24.0。16S r RNA序列比对及系统发育分析结果表明,菌株NEAU-BS7与Streptomyces nigrescens NBRC 12894T（99.79%）和Streptomyces libani NBRC 13452T相似度最高（99.79%）,且与这两株菌形成一个稳定分支,结合生理生化特性和培养特征,将菌株NEAU-BS7归属于链霉菌属。（4）防御酶活性实验中,经菌株NEAU-BS7孢子悬液和小麦根腐病原菌同时处理的小麦植株中的防御酶PPO、POD、CAT、SOD的活性与对照组相比,明显升高。说明菌株可以通过诱导防御酶的表达提高小麦的抗病能力。（5）固体发酵实验结果表明,麦麸:蚯蚓粪=2:1为最佳基质比。选择含水量、p H和温度为自变量进行条件优化,最优条件为含水量72%,p H 6,温度31℃,发酵7天,产孢量最优,为2.7±0.2×1012CFU/g。生物菌肥盆栽实验显示,当土壤中孢子浓度为10~8CFU/g时,防效最好,为68.3%,病情指数从77.1下降至24.4。（6）液体发酵上清液粗提物和沉淀粗提物对麦根腐离蠕孢菌（B.sorokiniana）的抑菌率分别为42.5%和40.2%。（7）菌株NEAU-BS7的基因组总长度为9,374,644 bp,DNA的G+C含量为71.0%,编码基因有8,086个,在预测的31个次级代谢产物合成基因簇中,发现有些基因簇具有合成抑菌活性物质的潜力。
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