CD8+T淋巴细胞在动脉粥样硬化斑块中作用的研究

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目的通过应用基因敲除(APOE-/-)小鼠的动脉粥样硬化斑块的模型进一步探讨免疫反应在动脉动脉粥样硬化的作用。方法把APOE基因敲除(APOE-/-)小鼠及C57BL/6小鼠分别分为两组,每组分为高脂饮食组及普通饮食组,建立不同动脉粥样硬化模型。用主动脉标本作HE切片染色及抗MMP-9、抗CD8+、及抗OX-LDL的免疫组织化学染色、拍照,并进行图片分析,通过测得抗OX-LDL、抗CD8+和抗MMP-9的免疫沉淀物灰度值作定量分析。用ELISA方法测定小鼠血浆中MMP-9与OX-LDL水平。结果动脉粥样硬化模型中的斑块大体形态:APOE-/-高脂饮食组小鼠有动脉粥样硬化斑块形成,斑块主要集中在主动脉分叉处,斑块数量中等,某些小鼠腹主动脉可见斑块。APOE-/-正常饮食组小鼠无动脉粥样硬化斑块形成。C57BL/6高脂饮食小鼠未见动脉斑块形成,但腹腔及各组织脏器表面脂肪含量明显增多,C57BL/6正常饮食组(对照组)小鼠无动脉斑块形成。HE染色标本中,APOE-/-高脂饮食组斑块程度、泡沫细胞数量较对照明显增多,C57BL/6高脂饮食组较正常对照组斑块程度、泡沫细胞数量增多,但程度较轻,APOE-/-正常饮食组与正常对照组相比,内膜光滑,无明显差别。免疫组化染色结果:APOE-/-高脂饮食组抗MMP-9、OX-LDL含量较正常对照组明显升高,抗CD8含量较正常对照组明显减少,有统计学意义(P<0.01)。C57BL/6高脂饮食组抗MMP-9、OX-LDL含量较正常对照组有升高,CD8含量较正常对照组减少,但较APOE-/-高脂饮食组程度减轻,有统计学意义(P<0.01)。APOE-/-正常饮食组,抗MMP-9含量较正常对照组升高,但无统计学意义(P>0.05), OX-LDL含量较正常对照组升高,CD8较正常对照组减少,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。血清检测结果:APOE-/-高脂饮食组MMP-9、OX-LDL含量较正常对照组明显曾高,有统计学意义(P<0.01)。C57BL/6高脂饮食组MMP-9、OX-LDL含量较正常对照组升高,有统计学意义(P<0.01)。APOE-/-普通饮食组,血清MMP-9含量升高,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05), OX-LDL含量升高,与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论在动脉粥样硬化过程中,CD8+T淋巴细胞的表达与动脉粥样硬化斑块的数量、程度成负相关,OX -LDL和MMP-9的表达与动脉粥样硬化斑块的数量、程度成正相关,与CD8+T淋巴细胞在动脉粥样硬化中的表达程度呈相反趋势。
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