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人参为五加科植物人参的根茎,是传统的滋补佳品,在中国已经有四千多年的历史。人参皂苷被认为是人参最主要的活性成分之一。大量研究表明,人参皂苷具有抗炎症、抗氧化和抗肿痛等多种生物学活性功能。然而,人参皂苷在体内生物利用率低,难以发挥显著疗效。鉴于人参皂苷低生物利用率,不易通过吸收屏障如小肠粘膜细胞膜双磷脂结构,将人参皂苷改性成人参皂苷脂肪酸酯,促进其在机体内的累积,提高其生物细胞膜亲和力,将有助于提高其功能活性。本文采用人参皂苷Rh2和辛酰氯进行酯化反应得到产物Rh2辛酸酯,并以Caco 2细胞为研究对象,考察Rh2和Rh2辛酸酯的跨膜转运和吸收机制：以人源肝癌细胞HepG2为研究对象,考察Rh2及Rh2辛酸酯在体外的抗肿瘤效果,并从细胞分子水平阐述Rh2和Rh2辛酸酯抑制HepG2细胞增殖和诱导HepG2细胞凋亡的相关机制；以H22荷瘤小鼠为模型,研究Rh2和Rh2辛酸酯的体内抗肿瘤效果及其机制。主要得到以下结论：1.人参皂苷Rh2和辛酰氯发生酯化反应得到产物Rh2辛酸单脂,分子量为748.87,酰化位置发生在Rh2的12号碳上的羟基上2.研究表明Rh2-O在Caco 2单层细胞中的吸收效果高于Rh2。在10-50μM浓度范围内,Rh2相应的Papp值(AP-BL,0.21×10-6cm/s)经酯化后提高至1.96×10-6cm/s。Rh2的主要转运机制为跨细胞的被动扩散,并且伴随着主动外排泵参与BL-AP方向的转运。而Rh2-O在Caco 2单层细胞中的渗透机制为被动扩散,无主动排除参与。Rh2和Rh2-O的主要转运路径为跨细胞路径,而非细胞旁路径。3. Rh2-O对HepG2细胞生长抑制作用和诱导HepG2细胞凋亡的能力均优于Rh2。Rh2-O处理HepG2细胞24 h的IC5o为20.15 gM,约为Rh2的IC50的一半。IC50剂量下的Rh2-O对人正常肝细胞HL-02无显著毒性。4.Rh2-O通过下调细胞内周期蛋白cyclin D3,cyclin E, CDK4, CDK6, 2]wAF1/CIP1和p27KIPI的表达水平诱导HepG2细胞发生G1周期阻滞。p38 MAPK磷酸化和Akt失活参与了Rh2-O诱发HepG2细胞G1周期阻滞这一过程。5.Rh2和Rh2-O可同时通过外在死亡受体信号通路和内在线粒体信号通路激活caspase家族凋亡蛋白,诱导细胞凋亡。溶酶体膜通透化是线粒体功能紊乱的上游通路。6.口服5 mg.kg和10 mg/kg的Rh2和Rh2-O对H22荷瘤小鼠具有显著的抑瘤作用,并且对小鼠本身无显著毒性。Rh2-O的抑瘤率为50.6%,抑瘤作用显著优于Rh2(28.2%)(P<0.05)。7.Rh2-O和Rh2均是通过诱导肿瘤细胞凋亡、改善荷瘤小鼠的免疫系统和抑制肿瘤血管生成来实现抗肿瘤活性。Rh2和Rh2-O均可通过调节Bcl-2家族蛋白的表达水平,并激活caspase家族蛋白来诱导肿瘤细胞凋亡的。此外,Rh2和Rh2-O通过增加IL-2和TNF-a水平,T淋巴细胞数量,CD4+/CD8+匕例和NK细胞水平来改善荷瘤小鼠的免疫系统。8.Rh2和Rh2-O的体内体外抗肿瘤活性的作用机制相似。Rh2-O的抗肿瘤活性优于Rh2可能是由于Rh2-O具有更高的吸收率。