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抗生素的滥用导致抗生素耐药菌和耐药基因随生活污水和养殖废水的排放在环境中肆意散播,对公共卫生安全造成潜在威胁,其环境行为效应越来越受到关注,其去除工艺也成为亟待解决的难题。人工湿地因是一种具有广谱去污能力,且经济、高效、易于维护和管理的人工污水处理生态系统,得到广泛的应用。但目前关于人工湿地中抗生素耐药菌及耐药基因的相关研究还较缺乏,开发人工湿地去除污水中抗生素耐药菌的研究也未见报道,为此本文旨在探究人工湿地系统中抗生素耐药菌和耐药基因的环境行为规律,查明人工湿地去除耐药菌效率及相关影响因素,以期为开发和优化人工湿地,使之既能满足污水中常规污染物处理效果,又能高效削减污水中耐药菌生物量,保障湿地出水生态安全性。本文以大肠杆菌Escherichia coli为指示微生物,采用滤膜法,从12套不同工艺构型的模拟人工湿地的进、出水及基质生物膜的25个采样点共计分离出大肠杆菌1406株,参照Kirby-Bauer纸片法测定了全部菌株对7种常见抗生素的耐药水平,包括复方新诺明、四环素、氨苄西林、氯霉素、庆大霉素、环丙沙星、头孢他啶,并应用PCR技术对耐药菌株数较多的复方新诺明(545株)和四环素(582株)耐药菌株分别进行了磺胺类常见耐药基因sulR(sul1、2、3)与四环素类常见耐药基因tetR(tetA、B、C、D)的检测,了解耐药菌及耐药基因的分布规律,而为了探究湿地系统内部耐药基因可能存在的环境迁移行为,本文还开展了全部耐药菌株(930株)中整合子(Integron)这一类转移元件测定及基因盒(Gene cassette)的测序,主要的实验结果如下:1.人工湿地中的大肠杆菌对7种抗生素的耐药差异较大,以四环素、复方新诺明和氨苄西林的耐药率较高,25%以上,而其他4种则较低,不足20%;2.人工湿地能有效去除污水中70%左右的耐药大肠杆菌,有效的降低了耐药菌进入环境的风险;3.模拟湿地不同位点的耐药率和耐药组合方式有显性著差异,整体表现为进水<出水<基质生物膜;4.模拟湿地基质生物膜耐药水平受工艺类型影响显著,并以潜流湿地中多重耐药指数最高(0.34),而表面流(0.25)、垂直下行流(0.23)及垂直上行流(0.16)较低;5.磺胺类sulR和四环素tetR耐药基因的检出率以及耐药基因的组合方式在不同采样点差异较大,总体表现为进水<出水≤基质生物膜;6.在各采样点均有不同水平的整合酶和基因盒的检出,其中Ⅰ型整合酶占主要,而基因盒共计检出8种类型,以携带aadA和dfrA家族基因为主。推测整合子介导耐药基因的传递在一定意义上影响着人工湿地系统中耐药基因的水平。终上所述,一方面,人工湿地能有效地削减污水中抗性大肠杆菌生物量,降低其进入环境的风险;另一方面,人工湿地基质生物膜充当着抗生素耐药菌及基因的潜在储存库及释放源的作用。因此,如何进一步降低出水抗性水平和抗性基因的检出率,又能高效削减污水中抗性菌和抗性基因,还有待进一步的研究。