植物枇杷叶黄酮类化合物提取与抑菌性研究

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枇杷叶为蔷薇科植物枇杷[Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.]的叶,含有丰富的黄酮类化合物,具有良好的抗炎和止咳作用[1],临床常用于治疗急、慢性呼吸道疾病。黄酮类化合物无毒,广泛存在与植物界中,人体不能合成,而且在人体内代谢很快。近年来黄酮类化合物的提取成为热点,寻找高效,迅速且简单的提取方法获得最佳结果已成为研究者探讨的热门。本论文着重以干燥枇杷叶为材料,进行均匀设计方案优化乙醇法枇杷叶黄酮类化合物超声提取工艺、枇杷叶黄酮类化合物提取液超滤膜过滤、大孔树脂精制枇杷叶黄酮类化合物超滤液工艺探讨及枇杷叶黄酮类化合物抑菌试验与分析等4部分的试验研究与分析。主要结果如下:1.通过单因素试验分析了超声波乙醇水溶剂提取枇杷叶的黄酮类化合物浓度随水溶剂乙醇浓度、液料比A、原料细度、提取温度B、提取时间C和超声波功率D的变化规律。在单因素试验结果分析基础上,采用均匀设计试验方案优化乙醇法枇杷叶黄酮类化合物超声提取工艺为:原料粒度200目、水溶剂的乙醇浓度75%、液料比18:1、提取温度73°C、超声波功率350W、提取时间52min。建立以液料比A、提取温度B、提取时间C及超声波功率D等4个主要影响因素为自变量,提取液中黄酮类化合物吸光度值x为因变量的回归方程为: x = 62.1155+1.4330A+1.0747B+0.3783C+0.0012D-0.0348A2 -0.0064B2 + 0.0040BC-0.0011 C2,F = 12.244 > F0.05(8,3) = 8.845。2.采用单因素试验寻找枇杷叶黄酮类化合物超声提取液分离的最适超滤膜、通过正交试验方案分析了超滤膜分离枇杷叶黄酮类化合物提取液的最优条件。试验结果表明,膜截留相对分子量20000的超滤膜可以除去提取液中大分子杂质,得到最大量的黄酮类化合物;枇杷叶黄酮类化合物提取液超滤膜分离工艺的最优条件为:膜压力0.3Mpa,进样温度50℃,样液与纯净水体积之比为1:1。3.采用单因素实验分析树脂种类、pH值、洗脱剂浓度对枇杷叶黄酮类化合物超滤透析液的精制影响,调节样液pH值,增强大孔树脂对黄酮类化合物的特异性吸附,并且分析乙醇浓度对吸附后树脂的洗脱效果,确定枇杷叶黄酮类化合物的最佳洗脱条件,使吸附黄酮类化合物最大程度的回收。静态吸附解吸试验表明,HZ830树脂更适宜纯化枇杷叶黄酮类化合物,上样液的pH值调至3.0左右,对枇杷叶黄酮类化合物的吸附量最大,吸附饱和后再用65%乙醇水溶液洗脱效果更好,黄酮类化合物的回收率达到90.09%。4.选取金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、青霉、啤酒酵母4种菌对精制的枇杷叶黄酮类化合物进行体外抑菌试验,测定抑菌圈,观察抑菌性,测定最低抑菌浓度。结果表明:枇杷叶黄酮类化合物对细菌有较强的抑制作用,对青霉和啤酒酵母菌的抑制作用不明显。枇杷叶黄酮类化合物溶液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、青霉的最低抑制浓度分别为750μg/mL、187μg/mL、1500μg/mL。枇杷叶黄酮类化合物不失为一种理想的抑菌添加剂。本研究提供的结果和结论可供枇杷叶黄酮类化合物提取产业化与合理化作业参考。福建是我国枇杷生产大省之一,目前大多数的枇杷落叶一般作为垃圾处理,不仅造成资源浪费,而且焚烧污染环境,对该资源的有效利用具有良好的社会效益和经济效益。
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