论文部分内容阅读
为确定cGMP在CO对果实抗病诱导过程中的作用,本文以冬枣为试验材料,采用采后病理学、生物化学等方法分析了cGMP在CO对枣果实生理生化防卫反应中的作用。在此基础上利用荧光定量PCR技术研究了防卫基因的表达变化,以期从分子生物学水平揭示CO与cGMP信号通路的关系。本试验将运回的冬枣平均分成四组,其中三组用10μmol/L CO熏蒸2 h,再取其中两组用配制好的10μmol/L ODQ(鸟苷酸环化酶抑制剂)和10μmol/L ODQ+5μmol/L8-Br-cGMP(外源cGMP类似物)溶液处理枣果实,处理后24 h进行损伤接种链格孢菌5μL(Alternaria alternata,1′105个/mL)。接种后定期取样以测定相关生理生化指标和防卫基因的表达量。主要研究结果如下:(1)与CO+ODQ相比,CO和CO+ODQ+8-Br-cGMP处理不同程度地抑制了枣果实病斑直径的扩展,降低了冬枣的转红率、腐烂率和失重率。此外,CO能通过cGMP信号在贮藏前期提高冬枣的硬度、可溶性固形物(TSS)和可滴定酸(TA)含量,但作用效果不显著。(2)相比于CO+ODQ处理,CO和CO+ODQ+8-Br-cGMP处理诱导了枣果实PAL、C4H、4CL和CHS活性的升高,促进了代谢产物总酚、黄酮、木质素的积累。由此说明,CO能通过cGMP信号激活枣果实苯丙烷代谢途径,增强果实的抗病性1。(3)贮藏前期,CO能通过cGMP信号加快O2·-产生速率、增加H2O2含量,同时还诱导了NOX、SOD、POD活性的升高,抑制了CAT活性。与CO+ODQ相比,CO和CO+ODQ+8-Br-cGMP处理还提高了枣果中APX活性和AsA含量。上述结果说明,CO通过cGMP信号调控了枣果中活性氧代谢,提高了果实的抗病能力。(4)与对照相比,CO和CO+ODQ+8-Br-cGMP处理提高了损伤接种A.alternata的枣果中病程相关蛋白PPO、CHT和GLU活性,减少了采后病害的发生。(5)CO通过cGMP信号能增强枣果实PAL、PPO、SOD、POD、CHT、GLU基因的表达,抑制CAT基因的表达,且变化趋势与酶活性变化相对应。上述研究表明,采后CO处理可通过cGMP信号诱导果实的抗病性,减少采后病害的发生。果实抗性的增强与苯丙烷代谢、活性氧代谢的活化、病程相关蛋白的激活和防卫基因的表达密切相关。