树突状细胞(Dendritic eells,DCs)是目前所知的机体内功能最强的专职性APC,能够有效地摄取、加工及提呈抗原,通过其表面B7、MHC-Ⅱ和ICAM-1等分子的表达,刺激CD4~+T细胞的活化增殖,促进IL-2的分泌,在双信号刺激下,最终活化CD8~+T细胞,产生免疫应答效应。脐血中富含的CD34~+造血祖细胞与骨髓和外周血相比,数量更多,具有更强的增殖潜能,是DCs的理想来源。体外,不同细胞因子联合可诱导CD34~+造血祖细胞分化为DCs,在肿瘤免疫、移植免疫和抗感染免疫等方面发挥效应。脐血CD34~+造血祖细胞来源的DCs分化发育和成熟经历了一系列复杂而精细的调节过程,探讨DCs分化发育、成熟过程的调节因素及其生物学功能,将有助于开展以DCs为佐剂的生物治疗。 本研究优化了体外扩增、诱导CD34~+造血祖细胞产生DCs的方案,首次系统分析脐血CD34~+造血祖细胞来源DCs分化成熟过程中共刺激分子的表达及其相互作用,比较CD40、TNF-α和4-1BBL三条信号途径对DCs分化成熟和生物学功能的影响,探讨脐血贴壁细胞来源DCs相关抗原和共刺激分子的表达及其生物学功能,以期扩大DCs的来源,通过干预CD40/CD40L、4-1BB/4-1BBL、PD-1/PD-L1/PD-L2等几对重要的共刺激分子来调节脐血衍生的DCs生物学功能,为肿瘤免疫和移植免疫的临床应用提供实验和理论依据。 第一部分 脐血CD34~+造血祖细胞体外诱导树突状细胞的优化方案及其调节因素 目的:体外定向诱导CD34~+造血祖细胞产生髓系DCs,比较不同细胞因子组合对CD34~+造血祖细胞扩增效率及其生物学功能的影响,建立体外扩增诱导脐血CD34~+造血祖细胞产生DCs的优化方案。