【摘 要】
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着丝粒是染色体上的特殊位点,引导细胞分裂期间染色体的分离。CENP-A是组蛋白H3的变体,在大多数真核生物中特异性表观遗传标记着丝粒的位置,并作为动粒组装的基础。在一个物种中,着丝粒CENP-A核小体定位水平相对恒定并对于染色体的精确分离有预期重要作用。然而,不同真核生物中着丝粒区域CENP-A核小体的定位水平千差万别。目前,着丝粒CENP-A的定位水平如何影响着丝粒的功能与核型稳定性还未明确。通
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着丝粒是染色体上的特殊位点,引导细胞分裂期间染色体的分离。CENP-A是组蛋白H3的变体,在大多数真核生物中特异性表观遗传标记着丝粒的位置,并作为动粒组装的基础。在一个物种中,着丝粒CENP-A核小体定位水平相对恒定并对于染色体的精确分离有预期重要作用。然而,不同真核生物中着丝粒区域CENP-A核小体的定位水平千差万别。目前,着丝粒CENP-A的定位水平如何影响着丝粒的功能与核型稳定性还未明确。通过一系列特定的CENP-A/Cnp1突变体,本实验室前期在裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中实现了营养生长细胞着丝粒区域Cnp 1定位水平梯度降低,并发现着丝粒区域Cnp1水平逐级降低在不同程度上影响细胞生长。本项研究针对由于着丝粒处极低Cnp1水平引起不良生长的细胞进行反转子遗传筛选。前期工作发现的一类反转子,通过提高着丝粒处突变的Cnp1核小体定位水平回复细胞生长缺陷。本项工作新发现并着重研究另一类反转子,在保留极低Cnp1定位的情况下逆转细胞生长缺陷。在五个独立反转子的全基因组测序结果中,我们并未找到与细胞生长缺陷逆转相关的遗传突变。我们认为是一种非基因突变、但可遗传的表观遗传改变帮助细胞逆转生长缺陷。有趣的是,在该类反转子中,我们发现大量(超过20%)的反转子菌株通过同源区域单链退火发生染色体末端融合,表明着丝粒区域Cnp1定位水平变化影响细胞核型稳定性。综上,我们的实验结果揭示了裂殖酵母染色体着丝粒与细胞核型的灵活性并提示两者间可能的联系。我们猜测具有极低Cnp1定位的着丝粒表观遗传稳定性差,容易在细胞分裂代际间丢失,无着丝粒的染色体通过,甚至可能诱导与另一条具有功能着丝粒的染色体融合而存活。
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