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目的：构建人白细胞介素10（hIL-10）的原核表达载体，应用大肠杆菌表达hIL-10，并加以纯化，应用于小鼠气道过敏性炎症反应模型，研究外源性重组人白细胞介素10（rhIL-10）在过敏性炎症中的作用。 方法：抽取健康成人外周血，分离得到外周血单个核细胞（PBMC），应用刀豆素A（Con-A）刺激培养24小时，然后抽提细胞总RNA。通过RT-PCR方法扩增hIL-10cDNA，将hIL-10cDNA定向克隆于原核表达载体pBAD/gⅢA，应用PCR方法、酶切分析和序列测定筛选鉴定阳性克隆。培养筛选出的阳性克隆，应用阿拉伯糖诱导表达hIL-10，并进行初步纯化。实验小鼠雾化吸入诱导表达的rhIL-10，观察其在小鼠气道过敏性炎症中的作用。实验小鼠分为3 组，皆于第1、10天腹腔内注射20μg鸡卵蛋白加2mg的Al（OH）3，并于第22、23、24天作如下处理：预防组，致敏前24小时和05小时分别吸入rhIL-10（10ng）；治疗组，致敏后20分钟吸入rhIL-10（10ng），对照组，致敏后20分钟吸入PBS 2ml。对实验小鼠进行观察：第26天处死动物，用1ml PBS进行支气管肺泡灌洗，计数灌洗液中的细胞数量并进行分类，利用ELISA方法检测灌洗液中的IL-5含量。支气管肺组织应用10％的甲醛固定，石蜡包埋，切片进行HE染色，观察各组小鼠组织切片中炎症细胞的浸润情况。 结果：经DNA测序证实，克隆的hIL-10cDNA与文献报道的一致，应用ELISA方法检测证明在大肠杆菌中成功表达出了hIL-10，含量＞400pg/ml，检测其生物学活性与标准品无明显差异。应用hIL-10于实验小鼠发现，在治疗组和预防组支气管肺泡灌洗液中，炎症细胞较对照组明显减少，而以嗜酸细胞和中性粒细胞的减少最为明显。而预防组与治疗组相比，又以预防组的炎症细胞减少为著。而在病 — ———理切片中，预防组和治疗组支气管壁内炎症细胞的浸润较对照组少。治疗组和预防组灌洗液中IL—5 的含量较对照组明显为低，预防组和治疗组差异不明显。 结柏：纲胞因子在炎症反应的调节中起重要作用，由于 IL—10的抗炎和免疫抑制作用，本文设想应用 IL—10治疗支气管哮喘。我们构建了 hIL八 0的原核表达载体 pBADlhIL—10，并且发现外源性rhIL—10可以抑制小鼠支气管肺泡灌洗液中 IL—5的产生，这可能是由于 IL—10具有抑制炎症细胞在炎症局部浸润的特性。对 rhIL刁 0进行进一步纯化，可望应用于某些炎症性疾病的治疗。