论文部分内容阅读
抗生素和中草药联合使用不仅可以影响疗效,还能解决药物残留和耐药性的问题,在水产用药中具有良好的发展前景。本文研究了青蒿素在斑点叉尾鮰体内的安全性及药代动力学特征,然后研究了其对恩诺沙星药代动力学和残留消除规律的影响,为制定水产养殖中青蒿素和恩诺沙星的合理用药方案和休药期提供参考依据。首先,将斑点叉尾鮰按照不同剂量（20、50和100 mg/kg体重）连续口灌青蒿素5次,每次间隔24 h,观察试验鱼的活动状况,通过血清生化指标、组织外观和显微结构来判定青蒿素对机体的安全性。结果发现,各组试验鱼无死亡现象,生长状况良好;解剖观察组织器官无明显异常;各给药组的血清生化指标均正常;显微结构观察发现肝结构与空白组没有显著差异。这说明20～100mg/kg体重的剂量下连续口灌青蒿素5次对于斑点叉尾鮰的安全性较高。其次,研究了青蒿素在斑点叉尾鮰体内的药代动力学特点。将斑点叉尾鮰按照不同剂量（20和50 mg/kg体重）连续口灌青蒿素5次,每次间隔24 h。在第一次给药后0.5、1、2、4、6、8、10、12和16 h以及最后一次给药后0.5、1、2、4、6、8、10、12、16、24、48、72、120和168 h分别采集血浆。采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法检测血浆中青蒿素的浓度,绘制青蒿素在斑点叉尾鮰血浆中的药-时曲线,并采用Phoenix Win Nonlin 8.1药动学软件非房室模型得到斑点叉尾鮰血浆中的药代动力学参数,分析发现在50 mg/kg体重的剂量下连续口服5次青蒿素在斑点叉尾鮰体内可能存在自身诱导代谢现象。随后,研究了青蒿素对斑点叉尾鮰体内恩诺沙星药代动力学的影响。将斑点叉尾鮰分为单用恩诺沙星组和联合用药组。单用恩诺沙星组按20 mg/kg体重的剂量单次口灌恩诺沙星;联合用药组单次口灌恩诺沙星（20 mg/kg体重）和青蒿素（100 mg/kg体重）的混合液。分别在给药后0.5、1、2、4、6、8、10、12、16、24、48、72、120、168 h采集血浆、带皮肌肉、肝和肾组织。经超高效液相色谱-荧光检测器（UPLC-FLR）检测各组织中恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的浓度。恩诺沙星在斑点叉尾鮰体内血浆和各组织中的药动学参数如下,在单用恩诺沙星组中的血浆、带皮肌、肝和肾的Cmax分别为13.78mg/m L、13.29mg/m L、21.40mg/m L、26.30mg/m L;相应的Tmax均为12 h;λz分别为0.024 h-1、0.011 h-1、0.021 h-1、0.005 h-1;T1/2分别为28.79 h、63.93 h、32.70 h、139.76 h;AUC0-168分别为366.13mg×h/m L、746.56mg×h/m L、1016.42mg×h/m L、884.42mg×h/m L;Vz分别为2.20 L/kg、2.00 L/kg、0.88 L/kg、3.27 L/kg;CL/F分别为0.05 L×h/kg、0.02 L×h/kg、0.02 L×h/kg、0.02 L×h/kg;MRT0-168分别为45.36 h、102.14 h、50.27 h、140.55 h。恩诺沙星在联合用药组中血浆、带皮肌肉、肝和肾中的Cmax分别为3.79mg/m L、8.23mg/m L、15.38mg/m L、15.56mg/m L;相应的Tmax分别为12 h、12 h、16 h、12 h;λz分别为0.006 h-1、0.012h-1、0.015 h-1、0.021 h-1;T1/2分别为117.16 h、58.53 h、45.59 h、32.76 h;AUC0-168分别为95.71mg×h/m L、470.21mg×h/m L、614.03mg×h/m L、592.68mg×h/m L;Vz分别为27.89 L/kg、3.07 L/kg、2.02 L/kg、1.53 L/kg;CL/F分别为43.08 L×h/kg、64.53 L×h/kg、43.97 L×h/kg、44.19 L×h/kg;MRT0-168分别为104.89h、91.97 h、55.19 h、51.11 h。结果表明,青蒿素可以抑制恩诺沙星在体内的吸收和分布,且能加快恩诺沙星的消除。最后,研究了青蒿素对斑点叉尾鮰体内恩诺沙星残留消除规律的影响。斑点叉尾鮰连续口灌5次,间隔24 h。单用恩诺沙星组前3天以20 mg/kg体重的剂量口灌恩诺沙星,后2天口灌菜籽油;联合用药组前3次以20 mg/kg体重的剂量口灌恩诺沙星,后两次以100 mg/kg体重的剂量口灌青蒿素。两组分别在最后一次给药结束后1、3、5、7、10、15、20、25、30 d采集血浆、带皮肌肉、肝和肾组织。根据组织中恩诺沙星残留标示物浓度和规定的最大残留限量（MRL=100mg/kg）,采用WT 1.4休药期软件拟合血浆和组织中药物含量降至所需水平（MRL）所需的休药期（WT）。单用恩诺沙星组中,各组织的休药期大小依次为:肾（86.01 d）＞带皮肌肉（59.70 d）＞肝（52.40 d）＞血浆（42.30 d）;联合用药组中,各组织的休药期大小依次为:肾（62.80 d）＞肝（50.20 d）＞带皮肌肉（38.30 d）＞血浆（33.40 d）。结果表明,青蒿素可以降低恩诺沙星在斑点叉尾鮰体内的残留浓度,缩短恩诺沙星的休药期。