研究背景重度抑郁症（Major Depressive Disorder,MDD）是一种以情绪低落和快感缺失为主要特征的严重精神疾病,具有慢性、易复发的特点,严重者有自残、自杀的倾向。对社会交往和学习工作有一定的影响,也给社会和家庭造成了严重的负担。虽然大量研究针对抑郁症的治疗也取得了一定的进展,但对抑郁症的病理生理机制仍不明确,缺乏快速,精准的诊断指标。晚期糖基化终产物受体（Receptor for advanced glycation end products,RAGE）是一种膜结合蛋白,属于免疫球蛋白受体超家族成员之一,大量研究关注的是RAGE在急慢性炎症中的作用,但RAGE表达也存在于正常的脑组织神经细胞,其生物学意义不明,临床研究发现脑脊液与血液中RAGE的水平与抑郁症发病相关。研究表明在家族性淀粉样变性疾病中RAGE和TTR存在相互作用。RAGE是否介导了慢性应激诱导的抑郁样行为,其作用机制是否与调控TTR的表达有关尚不清楚。本课题采用慢性不可预见性应激模型、慢病毒sh RNA沉默RAGE表达模型和腺病毒过表达RAGE模型来研究RAGE信号通路是否可通过调控转甲状腺素的表达来参与慢性应激诱导大鼠抑郁样行为的发生。目的1.在慢性不可预见性应激诱导大鼠抑郁模型上观察RAGE,TTR在海马DG区的表达是否具有相关性。2.评估大鼠海马RAGE基因沉默是否可诱导抑郁样行为,抑制TTR及相关信号通路的表达。3.评估大鼠海马RAGE基因过表达是否可对抗抗抑郁样行为,增加TTR表达及激活相关信号通路。方法1.采用孤养加慢性不可预见性应激（Chronic unpredictable stress,CUS）的方法建立大鼠抑郁模型,经过4周后,进行行为学测试:糖水偏爱、旷场实验及强迫游泳。2.采用脑立体定位注射手术:分别对大鼠海马DG区注射RAGE sh RNA慢病毒和RAGE-AAV腺病毒,在对注射腺病毒组的大鼠进行慢性应激,最后测糖水偏爱、旷场实验及强迫游泳三种行为学实验。3.分子生物学检测:采用免疫印迹实验（Western blot,WB）,RT-QPCR,免疫化学（Immunofluorescence,IHC）和免疫荧光（Immumohistochemical,IF）的方法来检测CUS、RAGE sh RNA慢病毒和RAGE-AAV腺病毒模型中大鼠海马DG区RAGE、TTR及RAGE信号通路中:p38、p65和CREB的表达。结果1.慢性不可预见性应激可诱导抑郁样行为,海马DG、CA1和CA3区RAGE表达降低。海马DG中RAGE、TTR、p-p38、p-p65和p-CREB的蛋白水平也降低。2.RAGE sh RNA慢病毒颗粒抑制海马DG中RAGE的表达可诱导抑郁样行为。同时,TTR蛋白和m RNA水平显著降低,p38、p65和CREB的磷酸化水平显著降低。3.RAGE-AAV腺病毒颗粒使海马DG区RAGE过表达可对抗慢性应激诱导的抑郁样行为。同时,TTR蛋白和m RNA水平显著增加,p38、p65和CREB的磷酸化水平也显著增加。结论RAGE信号通路可通过调控TTR的表达来参与慢性应激诱导的抑郁样行。