【摘 要】
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背景和目的LncRNA(长链非编码RNA)是长度超过200个碱基、无编码蛋白能力的单链RNA。LncRNA参与许多生物学过程,包括细胞生长、迁移、转移、凋亡和肿瘤发生等。而且,异常表达的lncRNA针对肿瘤中的靶向基因起着促癌或抑癌的作用。越来越多的证据表明,lncRNA在肝癌(肝细胞癌)的发生和发展中起着重要作用。LINC01503是一个新发现的lncRNA。最近有研究报道,LINC01503与
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背景和目的LncRNA(长链非编码RNA)是长度超过200个碱基、无编码蛋白能力的单链RNA。LncRNA参与许多生物学过程,包括细胞生长、迁移、转移、凋亡和肿瘤发生等。而且,异常表达的lncRNA针对肿瘤中的靶向基因起着促癌或抑癌的作用。越来越多的证据表明,lncRNA在肝癌(肝细胞癌)的发生和发展中起着重要作用。LINC01503是一个新发现的lncRNA。最近有研究报道,LINC01503与食管鳞状细胞癌的进展有关,过表达的LINC01503促进细胞迁移、侵袭和增殖。此外,LINC01503还被证明在多种肿瘤类型中均具有致癌作用,包括结直肠癌、神经胶质瘤和胆管癌。然而,LINC01503在肝癌中的作用仍不清楚,值得进一步研究。方法通过TCGA(肿瘤基因组图谱)数据库和RT-PCR分别检测肝癌组织、正常肝组织和肝癌细胞株中LINC01503的表达水平。采用Logistic回归和Wilcoxon秩和检验评估LINC01503与临床病理特征之间的相关性。通过Kaplan-Meier或Cox回归分析评估TCGA肝癌患者的LINC01503表达水平与总生存期(OS)之间的关系。然后,使用GSEA v4.0.1软件的GO分析和KEGG分析研究了与LINC01503相关的潜在生物学功能和通路。体外实验中,使用携带p MSCV-puroLINC01503和p Super-puro-LINC01503-shRNA的逆转录病毒感染靶细胞,上调或下调肝癌细胞中LINC01503的表达。使用CCK8、克隆形成实验和流式细胞术观察LINC01503对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。体内实验中,通过注射荧光素酶标记的肝癌细胞建立裸鼠皮下种植瘤模型,通过小动物活体成像技术观察LINC01503的促瘤作用。另外,通过western blot和挽救实验探讨MAPK/ERK信号传导通路的激活。结果LINC01503在肝癌中高表达,与肝癌患者grade分级、stage分期、T分期以及预后不良呈正相关,并且LINC01503表达水平可作为肝癌患者总体生存期的独立危险因素。沉默LINC01503可显著抑制MHCC-97H肝癌细胞的增殖并促进其凋亡,而LINC01503在Huh7肝癌细胞中过度表达则可促进肝癌细胞增殖,抑制其凋亡。体内实验中,LINC01503可促进裸鼠皮下肝癌种植瘤模型的瘤体生长。从机制上讲,MAPK/ERK信号通路可被LINC01503激活,对其抑制可减轻LINC01503的促肿瘤作用,与GSEA(基因集富集分析)的预测一致。结论LINC01503在肝癌中高表达,与患者预后相关,其可激活MAPK/ERK通路促进肝癌的发展,这可能成为肝癌新的潜在生物标志物和治疗靶点。
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