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目的：表达SARS冠状病毒核壳蛋白，研究建立SARS冠状病毒感染血清学的诊断方法。 方法：构建携带SARS冠状病毒核壳抗原融合蛋白质粒，将表达载体转入大肠杆菌，原核表达His-N融合蛋白，鉴定其免疫原性，利用纯化的重组SARS冠状病毒N蛋白包被微孔板，建立间接ELISA法定性检测人血清中抗SARS冠状病毒IgG抗体的检测方法，进行质量控制，并利用该方法，检测、观察404份SARS患者血清中抗体产生和变化规律。 结果：获得携带SARS冠状病毒核壳抗原基因的pQE-30／N质粒，通过大肠杆菌M15表达体系，在IPTG诱导条件下，可稳定表达融合蛋白His-N。蛋白纯化后经SDS-PAGE电泳，证实经过纯化融合蛋白的纯度达到90％以上，Western blot结果显示：可与确诊的SARS病人的血清特异性结合。以抗原包被浓度0.10μg/孔包被16h，选择1∶4000为酶结合物工作浓度，建立检测血清N蛋白IgG抗体的间接ELISA法。检测正常献血员548份血清标本，确定临界值。将该检测方法与参比试剂进行比较，检测临床确诊和血清学确证86例病人血清标本，对发病15天以上样本检测结果符合率达到100％。且血清标本N蛋白特异性抗体的阳性率均随着病程的延长而增高，符合SARS病毒感染后血清IgG抗体产生规律。因此，在选择基因工程抗原来代替SARS-CoV灭活裂解产物用于SARS的诊断时，N蛋白是最佳选择，并且由于不需要培养SARS冠状病毒，因而具有较高的生物安全性。 结论：用纯化基因工程SARS冠状病毒N蛋白建立的ELISA方法，可稳定地检测人血清中抗SARS冠状病毒IgG抗体，敏感性好，特异性强，N重组蛋白对于SARS诊断试剂的研究具有重要价值，用于SARS患者血清抗体水平的检测，为SARS临床诊断提供参考。