高效液相色谱因其强大的分离分析能力已被广泛应用于许多研究和工业领域,如生物化学、毒物学、化学化工、临床医学、神经生物学、食品卫生、环保检测和质量控制等。该法也是分析化学中发展最快、应用最广泛的领域之一。然而,由于样品中被测组分本身性质及其低含量的限制,并非所有化合物都可直接用于液相色谱分析。因此提高方法的检测灵敏度具有非常重要的意义。荧光检测具有很高的灵敏度,利用荧光标记技术使本身不发荧光的化合物(如氨基酸、脂肪胺、脂肪酸等)转化成发射荧光的衍生物,能够实现高灵敏荧光检测。本文重点研究了两种新型荧光标记试剂的合成和表征,考察了荧光标记试剂的光谱性质,优化了衍生反应条件、色谱分离条件,并将建立的方法应用于不同生物样品的分析。具体工作如下:第一章:首先介绍了高效液相色谱的原理及化学衍生法中的柱前衍生和柱后衍生。简述了高效液相色谱的发展过程及其基础知识。其次综述了近年来出现的一些荧光标记试剂和它们所适用的检测对象。着重介绍了部分荧光试剂在羧酸类、有机胺类化合物的高效液相色谱分析中的应用及其缺陷。最后阐明了本课题的主要研究内容及其实际意义。第二章:设计并合成了两种荧光标记试剂:2-(2-(10-蒽基)-苯并咪唑)-乙基-对甲苯磺酸酯(ABETS),2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)-异丙基氯甲酸酯(DBCPC-Cl),并对其结构表征、紫外光谱和荧光光谱性质进行了研究。第三章:将荧光标记试剂ABETS用于短链脂肪酸和长链脂肪酸的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立了脂肪酸的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法。并将该方法用于瑞香狼毒根样品中脂肪酸的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。结果表明此方法具有良好的重现性和较高的检测灵敏度。第四章:将荧光标记试剂DBCPC-Cl用于脂肪胺和芳香胺的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立了脂肪胺的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法。并将该方法用于污水中脂肪胺的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。研究结果表明,此方法具有简单易行,反应后不需预处理即可进样,不需要相转移催化剂,检测灵敏度高等优点。