橘小实蝇蛋白饵剂化学组成分析及生物学活性测定

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:xiaobaitu11
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本论文主要研究了马来西亚Pupuk Alam公司的Prima饵剂、美国陶氏益农公司的GF-120(又名猎蝇0.02%饵剂)及自制蛋白饵剂的基本性质和各组成成分的含量,并初步探究了蛋白饵剂引诱橘小实蝇的活性成分。结果如下:1.蛋白饵剂的基本性质分析以3种蛋白饵剂为实验材料,测定比较了pH、固含量、吸潮性、粘度、重金属有害物质等5项基本指标。结果显示:GF-120的pH为3.85;固形物含量为43%;粘度为5.721×10-3。Prima饵剂pH为3.67;固形物为23%;粘度为1.036×10-3。自制蛋白饵剂的pH最大,为5.70;固形物含量为33%;粘度为1.263×10-3。3种蛋白饵剂的吸水与环境中的水汽含量有关,湿度越大,吸水越多。当湿度≤70%时,吸潮增重百分率随温度的升高呈减小趋势,湿度≥70%时,吸潮增重百分率随温度的升高呈先下降再上升趋势。金属元素的含量GF-120最高,Prima饵剂含量居中,自制蛋白饵剂含量最低。2.蛋白饵剂的组成分析采用考马斯亮蓝法(Bradford法)和凯氏定氮法测定3种蛋白饵剂中粗蛋白含量。Bradford法通过绘制标准曲线,经计算得出GF-120含量最高为25.5mg/mL、Prima含量最低为5.8mg/mL、自制蛋白饵剂含量居中为6.6mg/mL;凯氏定氮法测得GF-120含量最低为5.4mg/g,Prima饵剂含量居中为8.9mg/g,自制蛋白饵剂含量最高为9.4mg/g。Bradford法所测得的未知蛋白的含量是相对于标准蛋白含量而言的,而凯氏定氮法是通过氮含量的测定,所得为蛋白质的绝对含量。所以,凯氏定氮法较Bradford法测得的粗蛋白更准确。使用标准分子量蛋白质采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS电泳)得GF-120中的蛋白质分子量大约在20ku以上。Prima饵剂和自制蛋白饵剂的蛋白质分子量大都小于26ku。Prima饵剂有一明显的条带,其分子量大约为26ku。采用柱前衍生高效液相色谱法(AccQ Tag法)测定3种蛋白饵剂中氨基酸的种类及含量,结果表明除GF-120含有8种游离氨基酸外,其他两种蛋白饵剂中均含有17种游离氨基酸,三者总氨基酸均为18种。GF-120中总氨基酸含量为1762.34mg/100mL,游离氨基酸总含量为255.68mg/100mL,多肽含量为1506.66mg/100mL;Prima蛋白饵剂游离氨基酸含量为573.64mg/100mL,总氨基酸含量为5284.76mg/100mL,多肽含量为4711.12mg/100mL;自制蛋白饵剂游离氨基酸含量为630.10mg/100mL,总氨基酸含量为6562.43mg/100mL,多肽含量为5932.33mg/100mL。利用直接法测定蛋白饵剂中总还原糖含量,结果显示GF-120含量最多,为28.2g/100g,其次是Prima饵剂,含量为9.1g/100g,自制蛋白饵剂含量最少,仅为5.3g/100g。因此采用酸水解的方法提高蛋白饵剂中总游离糖的含量,通过单因素试验和正交试验对糖类水解酸浓度、水解温度和水解时间3个影响因素进行分析。结果显示在本实验范围内,水解酸(盐酸)浓度对糖类的水解影响最显著,其次是水解温度,水解时间影响最小,最佳水解条件为酸(盐酸)浓度2.5mol/L,温度为95℃,时间为3h。3.蛋白饵剂的生物测定对3种蛋白饵剂而言,Prima和自制蛋白饵剂引诱橘小实蝇的效果比GF-120好,差异显著,Prima和自制蛋白饵剂引诱效果相当,差异不显著。对于蛋白饵剂的不同形态物而言,三者的引诱率差异不显著,说明三者引诱橘小实蝇的引诱物质与三者本身的形态无关。
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