刺参Apostichopus japonicus (Selenka),又称仿刺参,属棘皮动物门(Echinodermata),游走亚门(Eleutherozoa),海参纲(Holothuroidea),楯手目(Aspidochirota),刺参科(Stichopodidae),仿刺参属(Apostichopus),为典型的温带种类。刺参含有丰富的蛋白质和粘多糖,营养和药用价值极高。目前国内外对于刺参的研究和报道主要集中于海参的医用药用价值以及刺参的人工养殖技术方面,而对其分子遗传以及基因结构的研究鲜见报道。本实验运用TRIZOL Reagent提取刺参肌肉组织总RNA,用SMART cDNA Library Construction Kit构建cDNA文库。经测定原始文库滴度达到3.2×1 0 6,扩增后文库滴度达到5.1×109,重组率达到96.7% ,从扩增文库随机挑取12个克隆进行PCR扩增鉴定,结果显示所选的12个噬菌体克隆重组的cDNA插入片段大小为200bp～2500bp之间。通过各项指标验证成功构建了海参肌肉组织cDNA文库。为下一步开展大批量EST测序分析,从基因组水平研究这一重要水产养殖动物,及提升刺参功能基因研究水平,从基因组水平认识及从分子水平调控刺参的生长、发育、抗性和代谢规律奠定了基础。