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本研究以欧美杂种(Populus tremula×P. tremuloides)优良无性系为研究材料,通过对欧美山杨杂种组培繁殖技术的研究,优化组培系统,简化操作程序,降低试管苗成本。利用再生试管苗的幼化特性,结合试管外生根技术、扦插技术,达到大量繁殖优良材料的目的。探索适合欧美山杨杂种组培工厂化生产技术工艺体系,为欧美山杨杂种生产走上工厂化、产业化之路提供科学和技术依据。通过上述试验得到如下结论: 1.叶腋增殖途径组培快繁技术:诱导欧美山杨杂种快繁的最适培养基是NT+BA0.1mg/L+KT 0.5mg/L+2%蔗糖,分化率为100%,无性系平均再生新芽为6.9个;筛选出最适诱导欧美山杨杂种快速生根的培养基为WPM+NAA 0.3mg/L+IAA 0.05mg/L+2%蔗糖,无性系平均生根率在93%以上;组培苗移栽基质以泥炭土:沙=2:1为最佳;基质的灭菌处理以高温灭菌或代森锌加五氯硝基苯等量混合300倍液杀菌效果最好;移栽适宜温度为18~26℃,移栽后5天内湿度维持在60%以上,并且每天喷雾2次。通过试验,其优良处理的移栽成活率可达90%以上。 2.简化繁殖技术:培养基中的成分对诱导芽分化的影响程度由小到大依次为:自来水<肌醇<蔗糖<大量元素,各因素之间对芽分化的影响是相互独立的,无显著影响。分化培养基采用自来水进行配制,去除肌醇;采用微体扦插瓶外生根技术,无根试管苗以IBA浓度为20mg/L浸泡20 min和IBA浓度为100mg/L浸泡15 min生根效果最好,无性系的平均生根率均为77.3%;采用试管苗瓶外袋生根技术,无性系的平均生根率可达83.86%。 3.微插穗快繁技术:以移栽成活的组培苗作为采穗母株,剪取茎段后,再切成约1cm的小茎段,每小段留有一个叶片(一叶一芽结构);用于扦插的激素组合中以NAA+IBA浓度为20mg/L浸泡15 min、50mg/L浸泡10 min、100mg/L和150mg/L浸泡5 min中插穗生根效果好,其中以150mg/L浸泡5 min处理最优,其生根率最高达到93.75%;扦插最佳月份为5月份和6月份,7月份扦插的生根率及其成活率有所降低,到了8月份已不宜进行扦插。 4.成本核算:常规组培繁殖方法,估算出欧美山杨杂种单株苗木的成本为0.27元;若组培与瓶外生根技术、扦插技术相结合繁殖苗木,单株苗木的成本为0.19元,成本降低约为29.6%。