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目的研究GPER1在三苯氧胺(tamoxifen, Tam)诱导人乳腺癌MCF-7细胞肌动蛋白细胞骨架重构和细胞迁移中的作用，并探讨相关分子机制。方法采用高浓度4-羟基他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen, OHT)短时间冲击法诱导人乳腺癌MCF-7/TAM耐药细胞株（Tam-R），同时运用GPER1的特异激动剂G1长期处理MCF-7细胞（G1-R）。运用FITC标记的鬼笔环肽染色观察纤维状肌动蛋白（F-actin）动态变化，免疫荧光分析E-钙粘蛋白在野生型MCF-7细胞（MCF-7W）、Tam-R细胞及G1-R细胞中的表达及分布，pull-down和Western blot检测小GTP酶Rac1活性, Transwell细胞迁移实验评估F-actin骨架重构对Tam-R细胞迁移能力的影响。结果MCF-7W细胞中F-actin富集于毗邻细胞膜周边，呈典型鹅卵石形态，E-钙粘蛋白分布与F-actin相似，可在毗邻细胞膜周边形成完整的粘附连接；而分别使用1μmol/L的OHT和0.5μmol/L的G1培养6个月获得的Tam-R细胞和G1-R细胞的F-actin纤维出现板状伪足和应力纤维两种异常形态，细胞外围不能通过E-cadherin与周围细胞形成完整的粘附连接；与MCF-7W细胞相比，Tam-R细胞和G1-R细胞的迁移能力明显增强(P<0.05)。在Tam-R细胞中，GPER1的特异激动剂G1促进了F-actin骨架重构、Rac1的活化和细胞迁移(P <0.05)；GPER1的特异抑制剂G15和PI3K的抑制剂Wortmannin（WM）抑制了OHT引起的F-actin骨架重构、Rac1的活化和细胞迁移(P <0.05)；而ERK1/2的抑制剂U0126对OHT引起的F-actin骨架重构及细胞迁移无明显影响（P <0.05）。结论GPER1可能介导OHT激活PI3K，促进Rac1活化，诱导F-actin细胞骨架重构并促进Tam-R细胞迁移，在乳腺癌获得Tam耐药过程中发挥着重要作用。