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二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid, DHA)具有降血脂、抑制脑血栓形成、消除炎症和促进癌细胞凋亡等多种生物活性,利用裂殖壶菌发酵生产DHA具有含量高、产品质量和产量稳定、不含鱼腥味等众多优点,因此研究利用裂殖壶菌发酵生产DHA具有一定的理论意义和潜在的应用价值。论文首先研究了Schizochytrium limacinum JN168胞内油脂的提取方法,比较了酸热法、超声辅助提取法以及索式提取法三种常用的的油脂提取方法对于实验菌株的油脂提取能力,最终确立了最佳的提取方法为酸热提取法,提取溶剂体系为氯仿甲醇的等体积混合溶液;其后,研究了脂肪酸中DHA的纯化过程,首先将提取出的油脂用氢氧化钾的甲醇溶液处理成游离脂肪酸,然后通过尿素包埋和高效液相色谱相结合的方法对脂肪酸中的DHA进行了纯化,经尿素包埋富集后,DHA在脂肪酸中的比例由最初的42.27%提高到80.44%,初次富集后的样品经高效液相色谱进一步纯化,DHA含量升高至95.55%。为了提高DHA的产量,论文采用单因素实验、正交试验和均匀设计等实验方法对S. limacinum JN168液态发酵产DHA的培养基和培养条件进行了优化,确定了最佳的发酵培养基配方为:葡萄糖120g·L-1,酵母粉11g·L-1,乙酸铵1.5g·L-1,NaCl8g·L-1,MgSO4·7H2O4.6g·L-1,KCl0.5g·L-1,CaCl2·2H2O3.5g·L-1。最佳的培养条件为:培养基初始pH6.0,装液量50mL/250mL三角瓶,培养温度25℃,转速200r·min-1,发酵时间96h,此时DHA的产量为11.12g·L-1。论文最后对S. limacinum JN168发酵产DHA进行了5L发酵罐实验,根据裂殖壶菌的生长特性,研究了间歇补料、低速恒速补料、中速恒速补料和变速补料四种不同的补料策略对DHA产量的影响。在各种发酵方式中,变速补料模式所得的DHA产量和DHA平均产率最高,分别为15.60g·L-1和130.00mg·L-1·h-1,比分批发酵提高了39.04%和11.23%,其Yx/s和Yp/s也是所有发酵模式中最高的,因此确定变速补料为DHA的最佳发酵生产工艺。