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慢性酒精中毒性肌病(Chronic alcoholic myopathy,CAM)是由于长期酗酒引起的一种肌肉病,在嗜酒者中发病率约40%-60%,临床主要表现为肌无力、肌痛和肌萎缩,严重影响患者的生活质量。然而对其发病机制的研究却远远较酒精性肝病、酒精性心肌病为少。有资料表明基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在一些肌病肌萎缩和肌细胞的细胞外基质(ECM)纤维化中发挥重要作用。本实验旨在研究慢性酒精性肌病的发病过程中这些因子是否有表达。若能证明这些因子在酒精性肌病发病中发挥作用,则可以通过控制其生物学活性治疗该病,这对于慢性酒精性肌病发病机理的研究和防治有着重要意义。目的:本实验旨在建立大鼠慢性酒精中毒性肌病模型的基础上,观察TIMP-1和TIMP-2在酒精中毒性肌病中的表达情况。探讨其在慢性酒精中毒性肌病发病过程中可能起到的作用,从基因和蛋白水平进一步阐述该病发病机制,为慢性酒精中毒性肌病的临床防治提供理论依据,同时对于其他代谢性肌病的研究也提供一个平台。方法:(1)选健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠建立慢性酒精中毒性大鼠肌病模型,观察酒精灌胃前后大鼠体重、行为学变化及肌肉组织病理改变。(2)实验组用酒精给大鼠灌胃,对照组用含与酒精体积相等的生理盐水灌胃,两组均喂饲改良的全营养高脂饲料,于12周后,取后肢肌肉,在分离出腓肠肌、比目鱼肌、跖肌后,将各类肌肉均分别地制备成冰冻切片,经组织化学染色确认成模。(3)采用RT-PCR和Western blot的方法分别检测实验组和对照组大鼠骨骼肌中TIMP-1和TIMP-2的表达的差异。结果:(1)酒精染毒后,II型肌纤维较I型肌纤维病理损害更严重,酒精染毒大鼠出现了肌纤维变性、坏死,肌纤维萎缩呈三角形、条形或不规则形改变,肌间质结缔组织增生等典型的病理改变。(2) RT-PCR结果显示在慢性酒精中毒性肌病中,TIMP-1的表达水平增高,尤其是在腓肠肌更为明显,TIMP-2的表达不升高或升高不明显。(3) Western blot检测结果显示在慢性酒精中毒性肌病中,TIMP-1的表达水平增高,酒精能够激活和促进TIMP-1的表达,与RT-PCR结果相似,TIMP-2的表达不升高或升高不明显。结论:(1) TIMP-1的增高可能参与了骨骼肌间质纤维增生及其构成的改变(Ⅰ和Ⅲ型增多,Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原比值增高),诱导炎性细胞浸润,加重慢性酒精中毒性肌病的发生发展。(2) TIMP-2可能不直接参与骨骼肌间质纤维的增生及其构成的改变。