艾灸治疗实验性RA关节骨破坏的破骨细胞机制研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:huyanlongbad
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目的:观察艾灸对实验性RA家兔关节骨破坏的治疗效应,探索艾灸治疗RA家兔关节骨破坏的破骨细胞机制。方法:30只日本大耳白兔,雌雄各半,体重2.5±0.25 kg,随机分为三组:空白组、RA模型组、艾灸治疗组,每组各10只。使用弗氏完全佐剂将RA模型组、艾灸治疗组塑造为实验性RA模型。造模成功一周后开始采用温和灸治疗组动物“肾俞”、“足三里”穴,每天一次,每次30min,6天为一疗程,每疗程结束后休息一天,共治疗5个疗程。取动物右膝关节骨组织(保留软骨部分),用HE染色方法观察其病理形态,用免疫组化染色SP法计数破骨细胞,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测标本OPG、RANKL蛋白基因表达。结果:1、病理形态:RA模型组与空白组比较:软骨结构破坏严重,软骨表面粗糙,可见深及移行层的裂隙,部分样本软骨完全剥离(P<0.01),软骨细胞排列不整齐,四层结构分辨不清晰(P<0.01),潮线中断(P<0.01),骨小梁排列紊乱,小梁面积变窄,空骨陷窝增加,部分小梁断裂,破骨细胞增加;治疗组与RA模型组比较:软骨结构破坏较轻,软骨表明欠光滑(P<0.01),软骨细胞四层结构基本清晰,关节软骨内有少量炎细胞浸润,关节软骨轻度变性(P<0.01),潮线依稀可见(P<0.01),骨小梁排列轻度紊乱,可见少量空骨陷窝,小梁未见断裂。2、破骨细胞计数:RA模型组与空白组比较:RA家兔关节骨破骨细胞计数明显升高(P<0.01);艾灸治疗组与RA模型组比较RA关节骨破骨细胞计数明显降低(P<0.01)。3、(1) RANKL基因表达:RA模型组与空白组比较:RA家兔关节骨RANKL基因表达明显升高(P<0.01);艾灸治疗组与RA模型组比较:RA家兔关节骨RANKL基因表达较明显降低(P<0.05)。(2)OPG基因表达:RA模型组与空白组比较:OPG基因表达明显降低(P<0.01);艾灸治疗组与RA模型组比较:OPG基因表达明显提升(P<0.01)。结论:1、艾灸可以减轻实验性RA家兔关节骨破坏程度,延缓其进展;2、艾灸可能通过抑制RA家兔关节骨RANKL的过度表达、促进OPG的表达,进而抑制RA关节破骨细胞数量的异常升高,达到改善RA家兔关节骨破坏的作用。
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