论文部分内容阅读
非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素以外所致的肝细胞脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征。目前,NAFLD是西方国家慢性肝病的最常见原因,预计到2030年也将成为肝移植最常见的症状,目前并没有明确的治疗方法。因此,有效干预非酒精性脂肪肝具有极其重要的意义。众所周知,降胆固醇活性是益生菌最重要的有益作用之一。因此,降胆固醇益生菌的筛选也为益生菌型功能食品的开发提供良好基础。本论文以吉林省吉林市的“奶疙瘩”为原料,筛选有效降胆固醇的乳酸菌,通过建立高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠模型以及油酸和棕榈酸脂性培养基诱导的小鼠肝细胞脂肪变性模型,研究副干酪乳杆菌Jlus66对非酒精性脂肪肝的干预作用。主要研究内容及结果如下:1、降胆固醇益生菌的筛选从当地发酵乳中分离出六种益生菌(Jlus12,Jlus38,Jlus66,Jlus71,Jlus73和Jlus86)。Jlus66在模拟的胃肠液和胆汁盐中表现出高耐受性。高疏水性实验证明其肠道粘附性。总之,其具有较好的益生特性,经16S DNA鉴定为副干酪乳杆菌。体外胆固醇去除率高达61.40%。2、副干酪乳杆菌Jlus66对NAFLD的大鼠模型作用(1)与高脂饮食组相比,受试4×10100 cfu Jlus66的大鼠的体重减轻,肝指数降低,血清甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL)以及转氨酶(ALT)显著降低。组织病理学分析显示Jlus66有效降低肝甘油三酯,脂肪变性及炎症水平。(2)副干酪乳杆菌Jlus66能够减轻NAFLD大鼠的氧化应激水平。与HFD组相比,受试4×10100 cfu Jlus66的大鼠血清和肝脏丙二醛(MDA)含量明显降低,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性升高。(3)副干酪乳杆菌可以有效改善肠道微生物群。高剂量干预组改变了肠道菌群结构以调节血清脂多糖(LPS)浓度,L.paracasei Jlus66通过减少致病菌门(Proteobacteria和Fusobacteria)的丰度并且提高益生菌门(乳杆菌属,双歧杆菌属)的丰度来逆转NAFLD。3、副干酪乳杆菌Jlus66上清及菌体共培养对小鼠肝细胞脂肪变性的干预副干酪乳杆菌上清液的稀释度为1/321/2,菌体共培养浓度为1021010cfu/mL时,能够改善细胞模型脂肪变性。上清液稀释度为1/2时脂肪变性细胞内脂质含量减少21.90%;1010 cfu/mL时效果最为显著达38.88%。综上所述,副干酪乳杆菌Jlus66对非酒精性脂肪肝具有潜在的干预作用。