姜黄素对人乳腺癌细胞的抑制作用及其光照增强效果的观察

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背景和目的:乳腺癌仍然是威胁女性健康和生命的重要因素,寻找新的有效的治疗方法和治疗药物是解决这一问题的可行途径。光动力治疗是近年来兴起的治疗肿瘤的一种新方法。其原理是利用光敏剂能选择性地富集在肿瘤组织中,在相匹配光源激发下,发生一系列光化学反应,从而抑制和杀伤肿瘤细胞。姜黄素作为一种染料和食用色素具有悠久的历史,目前人们发现姜黄素不仅是一种广谱抗癌药,而具还具有光敏活性,是种潜在的中草药光敏剂。本实验以人乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,观察姜黄素对其的抑制作用,在明确姜黄素抑癌规律的基础上,利用实验研制成功的特异光源进一步观察光敏化姜黄素对乳腺癌MCF-7细胞抑制作用的增强效果,从而为姜黄素的临床应用提供理论支持,同时探索姜黄素作为一种新型光敏剂的可能性和应用前景。方法: (1)实验设8个组,正常对照组和7个实验组,7个实验组分别给予5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、60μM、80μM的姜黄素处理,采用MTT比色法、电镜观察等方法分别进行检测,研究不同浓度姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用,明确姜黄素抑癌规律。(2)在此基础上,建立体外光照系统,设正常对照组、单纯光照组、单纯姜黄素作用组和光动力实验组,采用MTT比色法和Hoechst 33258染色法进行检测,研究在特定时间内,光照对一定浓度姜黄素抑癌作用的增强效应。结果:(1)正常对照组的光密度(Optical density ,OD)值为1.243±0.253,各实验组的OD值依次是1.212±0.224、1.055±0.236、0.711±0.179、0.601±0.108、0.379±0.086、0.342±0.079、0.242±0.041。可见随着姜黄素浓度的增加, OD值逐渐降低;电镜也观察到随着姜黄素浓度的增加细胞器的改变逐渐明显,死亡细胞逐渐增多。(2)MTT比色法检测,得到正常对照组的OD值是1.561±0.278;各单纯光照组的OD值分别是1.322±0.195、1.289±0.126、1.295±0.113、1.300±0.210、1.135±0.084、1.260±0.220;单纯姜黄素作用组的OD值是1.179±0.200和0.927±0.200;光动力实验组OD值分别是0.665±0.146、0.597±0.144、0.597±0.142、0.536±0.049、0.370±0.132、0.131±0.318和0.343±0.063、0.286±0.059、0.187±0.022、0.185±0.060、0.135±0.021、0.116±0.014。发现在有姜黄素存在的前提下,OD值与姜黄素的浓度和光照时间成反比,单独光照对细胞的影响不明显。Hoechst 33258染色仅光动力实验组可见明显细胞凋亡和坏死,正常对照组、单纯光照组、单纯姜黄素作用组三组间未见明显差异。结论:1,姜黄素能显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖并且随着姜黄素浓度的增加这种抑制作用也随之增强。2,光照能明显增强姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用,因此姜黄素光动力作用有望发展成为一种临床治疗乳腺癌的新方法,有良好的应用前景。
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