转拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊重组胚的构建、移植及转基因羊的鉴定

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zbt_25
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蜘蛛牵丝是由蜘蛛体内一对主壶腹腺合成的天然蛋白质纤维,被誉为“生物钢”,具有广泛的应用前景。本研究主要目的是通过体细胞核移植手段制备被毛表达蛛丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊,有效改善羊毛品质,对提高细毛羊毛纤维的商业价值具有非常重要的意义。本文采用体细胞核移植技术,以转拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊胎儿皮肤成纤维细胞为核供体,去核卵母细胞为受体,制备转基因克隆重组胚716枚,取发育到桑葚期的胚胎进行RT-PCR检测显示外源基因已表达;胚胎移植受体羊44只,受孕12只,出生7只。对出生的转拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊在DNA、RNA水平进行检测,结果表明目的基因成功整合到细毛羊宿主基因组中并得以表达;检测转基因和非转基因细毛羊羊毛纤维韧性,结果表明,转基因细毛羊羊毛的拉力及拉伸度均高于非转基因细毛羊。
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