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1 目的 成瘾是精神活性物质长期作用于大脑而产生的神经适应性改变，而成瘾性物质的奖赏效应则被认为是产生精神依赖的最主要原因。近年来研究发现N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体参与阿片成瘾的形成。NMDA受体是离子通道偶联的大分子复合体，具有谷氨酸、甘氨酸、Mg2+、Zn2+、多胺等结合位点，其激活需要谷氨酸与甘氨酸同时结合在受体上。以往的研究已经发现竞争性和非竞争性NMDA受体拮抗剂能够抑制吗啡、可卡因和苯丙胺诱导的位置偏爱效应，但大多会产生严重的精神刺激和拟精神病样症状，甚至引起动物死亡。同时，条件性位置偏爱（conditioned place preference，CPP）实验也证明这两类NMDA受体拮抗剂具有奖赏效应，意味着存在潜在的成瘾可能性。相反，甘氨酸位点NMDA受体拮抗剂不会使动物产生精神症状，CPP实验也证实无奖赏效应。 MRZ2／576是德国MERZ公司开发的强效甘氨酸位点NMDA受体拮抗剂，半衰期约20min。动物实验已经证实它具有抗惊厥和神经保护作用，能够延缓纳曲酮促发的吗啡撤药症状的出现，延迟小鼠吗啡耐受现象的出现，且未见对吗啡精神依赖影响的报道。本实验研究MRZ2／576对吗啡诱导小鼠的条件性位置偏爱建立和表达的影响，以及小鼠运动活性的变化。 2 材科和方法 2．1 实验动物 ICR品系成年雄性小鼠，体重18～22g。2.2药物 MRZZ/576，化学名:8一ehloro一4一hydroxy一l一oxo一l，2一dihydroPyridaliono（4，5一b）quinol访e一5一oxide一eholinesalt（MERZ制药公司，德国）、盐酸吗啡注射液（沈阳第一制药厂）。2.3条件性位置偏爱实验装置 视频跟踪一计算机自动分析的小鼠条件性位置偏爱实验系统由本实验室自行构建，主要由小鼠活动盒、隔音箱、摄像系统和计算机组成。 视频图像采用自行开发的MiceTrack软件进行分析。2.4条件化训练程序 小鼠CPP实验包括两个阶段: 条件化训练:实验开始前用分离型隔板将活动盒的黑、灰区完全分开。实验开始后，实验组小鼠第1、3、5、7天注射药物后放到灰区内自由活动50min;第2、4、6、8天，给予生理盐水后放到黑区内自由活动SOmin。对照组小鼠除训练时腹腔注射生理盐水外，其它处理与实验组小鼠相同。 位置偏爱测试:实验第9天，采用通道型隔板，将小鼠放入活动盒15min，摄录视频图像，记录小鼠在灰区的停留时间和总运动距离。2.5小鼠的奖赏效应和运动活性 实验1:MRZ2/576自身的位置偏爱效应在本实验装置中，小鼠天然偏爱黑区。为研究MRZZ/576自身的奖赏效应，小鼠腹腔注射MRZZ/576后，放入灰区内训练;次日注射生理盐水后放入黑区内训练。每次训练50min，持续8天。第9天不给予任何处理测试CPP。生理盐水作为对照。 实验2:MRZ2/576对吗啡诱导CPP建立的影响为研究MRZ2/576是否能够影响吗啡诱导的CPP建立，实验组小鼠给予3组不同剂量的MRZ2/576（l .25，2.5和sm叭g）合并吗啡（sm叭g）腹腔注射后放入灰区训练，吗啡组小鼠接受吗啡注射后、对照组注射生理盐水后也在灰区内训练。次日各组小鼠注射生理盐 水后放入黑区训练。每次训练50min，持续8天。第9天不给予小鼠任何处理测 试CPP。 实验3:MRZZ/576对吗啡诱导CPP表达的影响条件化训练过程中，小 鼠在灰区内仅接受吗啡注射后训练，次日注射生理盐水后在黑区内训练，其它训练程序与上面相似。第9天小鼠腹腔注射MRZZ1576（l .25，2.5和sm眺g）、对照组注射生理盐水后立即开始CPP测试。2.6实验观察指标和统计方法 所有数据均表示为万士，。分析指标包括小鼠在灰区的停留时间和运动距离。用单因素方差分析、两因素重复测量资料的方差分析、LSD法多重比较以及肯德尔T一b法进行统计分析。3结果3.1测试剂量的MRz2/576（l .25，2.5和sm叭g）既没有条件性位置偏爱效应，也无位置厌恶效应（F（3，28）= 0.999，P二0.408）。各组间小鼠的运动距离也无显著差异（F（3，28）=l .436，尸=0.253）。相关性分析表明小鼠在灰区的停留时间与其运动活性之间没有相关性（r=一0.1 52，厂0.407）。3.2与生理欲水对照组相比，sm岁kg吗啡显著延长小鼠在灰区的停留时间 （P<0 .05），诱导小鼠建立了条件性位置偏爱。同吗啡组比较，sm叭g的MRZZ/576能够抑制吗啡诱导CPP的建立（p<0.05），而1 .25mg瓜g和2.smg/kg不能抑制吗啡诱导epp的建立（1 .25mg，厂0.342:2.smg/kg，尸=0.051）。但各组小鼠运动距离无显著差异（F（4，47）司.474，尸二0.225）。相关性分析表明小鼠在灰区的停留时间与小鼠运动活性无相关性（厂0.099，P=0.486）。3.3 sm叭g吗啡显著增加小鼠在灰区内停留时间（p<0.05），诱导小鼠建立了条件性位置偏爱。MRZ2/576剂量相关地减少小鼠在灰区的停留时间（l，25mg/kg，P=0.08;2 .sm叭g，p=0 .067;5m叭g，p<0 .001），其中sm叭g剂量组差异有显著性意义，表明能拮抗吗啡诱导cPP的表达。与此一致，sm叭g的MRZZ/576显著缩短小鼠的运动距离（p<0.001），反应了小鼠运动活性的降低。相关性分析表明小鼠在灰区的停留时间和运动距离?