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背景补体攻膜复合物C5b-9是经典途径、凝集素途径(MBL途径)、旁路途径3种途径补体活化的最终产物。国内外很多研究发现补体攻膜复合物C5b-9可激活单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞、血小板等,使之释放炎症介质(如IL-1β、IL-18等)和细胞因子,参与炎症反应。炎症因子IL-1β、IL-18在巨噬细胞泡沫化过程中发挥着重要作用。有研究表明IL-1β、IL-18的分泌主要受到NLRP3炎症小体的调控。基于此,我们提出假说:补体攻膜复合物C5b-9可能通过上调NLRP3炎症小体活性,从而促进THP-1巨噬细胞泡沫化。目的观察补体攻膜复合物C5b-9对THP-1巨噬细胞泡沫化的影响,并探讨其可能的机制。方法培养THP-1单核细胞,予以佛波酯诱导为THP-1巨噬细胞,ox-LDL处理THP-1巨噬细胞,使用RT-PCR的方法,检测0ug/ml,25ug/ml,50ug/ml,100ug/ml不同浓度ox-LDL处理THP-1巨噬细胞24小时后,以及ox-LDL处理0小时,12小时,24小时,48小时不同时间,THP-1巨噬细胞补体C9、NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18的mRNA表达水平;ELISA检测THP-1巨噬细胞分泌补体攻膜复合物C5b-9、IL-1β、IL-18的浓度;生化法检测THP-1巨噬细胞内胆固醇含量,同时油红O染色观察THP-1巨噬细胞脂滴形成情况;使用50nmol、100nmol荧光对照siRNA分别转染THP-1巨噬细胞24小时、48小时,观察其转染效率;根据荧光对照siRNA转染的最佳浓度和时间,使用不同序列的补体C9 siRNAS1、S2、S3处理THP-1巨噬细胞;通过RT-PCR和ELISA法检测THP-1巨噬细胞NLRP3,caspase-1,IL-1β,IL-18mRNA的表达以及细胞分泌补体攻膜复合物C5b-9,IL-1β,IL-18的浓度,并通过生化法和油红O染色的方法检测THP-1巨噬细胞内胆固醇含量以及荷脂情况。结果1.100nmol/l佛波酯诱导THP-1单核细胞24小时后,可转化为THP-1巨噬细胞。2.0μg/ml,25μg/ml,50μg/ml,100μg/ml不同浓度ox-LDL处理THP-1巨噬细胞24小时,发现与0μg/ml ox-LDL比较,25μg/ml-50μg/ml ox-LDL组巨噬细胞补体C9,NLRP3,caspase-1,IL-1β,IL-18 mRNA表达逐渐升高(P<0.05),其中50μg/ml ox-LDL组表达达高峰。用50μg/ml ox-LDL处理THP-1巨噬细胞0-48小时,发现与0小时比较,12-24小时组巨噬细胞补体C9,NLRP3,caspase-1,IL-1β,IL-18 mRNA表达逐渐升高(P<0.05),其中50μg/ml ox-LDL处理24小时时表达达高峰。3.0-100μg/ml ox-LDL处理THP-1巨噬细胞24小时,发现与0μg/ml ox-LDL比较,25μg/ml-50μg/ml ox-LDL组巨噬细胞补体攻膜复合物C5b-9,IL-1β,IL-18的浓度逐渐升高(P<0.05),其中50μg/ml oxLDL组浓度达高峰。用50μg/ml ox-LDL处理THP-1巨噬细胞0-48小时,发现与0小时比较,12-24小时组巨噬细胞补体攻膜复合物C5b-9,IL-1β,IL-18的浓度逐渐升高(P<0.05),其中50μg/ml ox-LDL处理24小时浓度达高峰。4.0μg/ml,25μg/ml,50μg/ml,100μg/ml不同浓度ox-LDL处理THP-1巨噬细胞24小时,发现与0μg/ml ox-LDL比较,25μg/ml-50μg/ml ox-LDL组巨噬细胞TC、FC、CE、CE/TC(%)及脂滴数量逐渐升高(P<0.05),50μg/ml ox-LDL组TC、FC、CE、CE/TC(%)达高峰,细胞脂滴数量最多。50μg/ml ox-LDL处理THP-1巨噬细胞0-48小时,发现与0小时比较,12-24小时组巨噬细胞TC、FC、CE、CE/TC(%)及脂滴数量逐渐升高(P<0.05),其中24小时时巨噬细胞TC、FC、CE、CE/TC(%)达高峰,且脂滴数量最多。5.100nmol荧光对照siRNA转染THP-1巨噬细胞48小时,其转染效率最高。RT-PCR检测发现补体C9 siRNA S2对THP-1巨噬细胞补体C9的沉默效果最好。6.与未沉默组比较,补体C9 siRNA沉默组THP-1巨噬细胞NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18mRNA的表达,细胞补体攻膜复合物C5b-9、IL-1β、IL-18的分泌,细胞内荷脂水平及泡沫化程度均减低(P<0.05)。结论补体攻膜复合物C5b-9促进巨噬细胞内脂质沉积和巨噬细胞泡沫化,其机制之一可能与上调巨噬细胞NLRP3炎症小体有关。