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在繁育季,从业人员对母马进行系统的繁育健康检查(BSE),尤其是评估母马的发情鉴定和排卵时机对于提高受精率尤为重要。马的排卵过程受内分泌系统和神经系统共同调节。近年来,利用促排激素及合成类似物预测排卵的临床应用较为广泛,但我国地方马品种的详细超声应用、繁育健康检查、促排激素水平测定情况及排卵前优势卵泡直径阈值等相关数据信息严重缺乏。研究发现,作为神经营养因子家族的β神经生长因子(Nerve growth factor-Beta,NGF-β)不仅作用于神经系统,而且对生殖系统也有重要调节作用。NGF-β在水牛、鸡和绵羊等不同动物的颗粒细胞和卵细胞上均有表达,且在羊驼和骆驼精浆中作为主要诱排剂,但其在马繁育方面的应用仍很少。因此,从NGF-β角度初步探讨其促进蒙古马排卵的相关应用研究,具有一定的科学意义。体内实验首先对94匹蒙古母马进行BSE,统计发现56匹母马排卵前48-72 h优势卵泡直径平均值为35.8 mm。其次,挑选出BSE正常的42匹年轻母马和2匹hCG耐受的母马,当优势卵泡达到35 mm,最后进行NGF-β促排应用(Ⅰ+Ⅱ)。其中NGF-β剂量及给药途径(包括肌肉注射,静脉注射和子宫内灌注)的筛选试验(Ⅰ)为NGF-β注射促排应用试验(Ⅱ)提供最佳给药方案。在NGF-β注射促排应用试验(Ⅱ)中通过比较12匹母马(n=3)在四个发情期里肌肉注射0.5mg NGF-β、马精浆粗液、1.0 mg地洛瑞林和等量生理盐水后促排情况,另外2匹hCG耐受母马给予肌肉注射2000 IU hCG、0.5 mg NGF-β、1.0 mg地洛瑞林和等量生理盐水探究母马促排情况。母马促排应用的结果主要根据直肠超声检查监测卵泡排卵情况进行判定。蒙古马血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)及NGF-β含量的测定试验、马精浆蛋白SDS-PAGE试验、马输卵管NGF-β及其受体TrkA免疫组化试验和NGF-β促进蒙古马卵母细胞体外成熟的体外试验,以体外培养原代蒙古马卵丘-卵母细胞复合体(COC)为切入点,添加50 ng/mL NGF-β处理后评估卵母细胞体外成熟培养情况。体外实验探讨蒙古马的内分泌激素规律以及正常排卵指标,研究NGF-β是否存在于蒙古马输卵管和精浆中,以及是否促进蒙古马卵细胞成熟。NGF-β剂量及给药途径的筛选试验(Ⅰ)结果显示1.0 mg和0.5 mg剂量给药组中除子宫内灌注组外,其余实验组促排率达100%(P<0.01)。最适NGF-β剂量为0.5 mg,给药途径为肌肉注射,为NGF-β注射促排应用试验(Ⅱ)最佳给药方案。结果表明:蒙古母马优势卵泡达到35 mm后,经肌肉和静脉途径注射等剂量NGF-β促排效果无明显差异,均促排良好。0.5 mg NGF-β与常规GnRH激动剂类似物(地洛瑞林)相比促排效果相近。NGF-β具有作为母马促排剂的潜力且对耐受hCG母马促排有效,但蒙古马精浆粗液及子宫输注NGF-β促排效果差。研究发现蒙古马精浆中存在NGF-β。NGF-β及其受体TrkA在发情期和间情期的蒙古马输卵管上均有表达,且发情期表达量高于间情期。由于仅一个马卵母细胞培养成熟,该部分未能作为结论。本研究阐述和实操的母马繁育健康检查(BSE)对从业人员进行马繁育临床实操具有重要的意义。描述蒙古马的内分泌激素以及正常排卵指标,对马的基础繁育生物学的知识有所贡献。探究活性NGF-β是否有潜力成为马促排卵剂,为后续开发兽药、诊疗,尤其对hCG耐受母马的诊疗应用以及后续马繁育研究开展提供一定程度的参考价值。