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目的：研究人去整合素域和金属蛋白酶-17(ADAM-17)反义寡核苷酸(ASODN)转染对前列腺癌PC-3M细胞侵袭和转移的影响。
方法：设计并合成靶向ADAM-17的ASODN及正义寡核苷酸(SODN),用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染PC-3M细胞。实验设空白对照组、脂质体组和SODN组、0.2μmol/LASODN组和0.4μmol/L ASODN组。应用Western blot检测细胞中ADAM-17蛋白表达水平,MTT法检测ADAM-17 ASODN对细胞增殖的影响,然后分别用重建基底膜侵袭模型,Transwell小室趋化运动模型以及明胶酶谱分析来研究转染后PC-3M细胞的侵袭性和趋化特性及基质金属蛋白酶(MMP-2,-9)活性的改变。
结果:PC-3M细胞被转染24h后,与空白对照组,脂质体组和SODN组相比,0.2μmol/L ASODN组和0.4μmol/L ASODN组ADAM-17蛋白表达均明显下调,0.4μmol/L抑制率可达51％(P<0.01);MTT法检测到随着ASODN浓度的增加及作用时间的延长,PC-3M细胞的增殖能力逐渐降低,至96h,0.4μmol/L抑制率为54.88％(P<0.01);与三个对照组相比,转染ASODN组细胞侵袭能力明显减弱,趋化运动降低,且MMP-2,-9活性有不同程度的下降(均P<0.05)。
结论：在前列腺癌侵袭转移中,阻断ADAM-17基因的表达,可能是阻抑前列腺癌侵袭和转移的一种新策略。