论文部分内容阅读
本研究用胃蛋白酶和碱性蛋白酶两种酶分别对螺旋藻中粗分离提取出的蛋白,酶解制备6000分子量以下的多肽,分别将两种多肽通过口服、腹腔注射、耳静脉注射三种给药方式实验家兔,依次给药处理3h,2h,2h后采血分离血清,用ELISA方法测定细胞因子IL-1β、IL-1ra、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-α、TGF-β含量的变化,并将这两种酶解多肽通过毛细管电泳分离得出肽谱图;用市售螺旋藻多肽保健品通过口服六种不同剂量药品对志愿者进行实验,检测人血清中32种细胞因子浓度的变化,测量手少阳三焦经上的六个穴位早中晚三个时间段给药前后的温度,考察人体早中晚温度变化情况和剂量的关系,穴位温度变化和剂量间的关系,细胞因子的变化情况与剂量间的关系,以期初步探索研究人体经络-穴位温度.细胞因子三者关系。
结果表明,从细胞因子变化看,胃蛋白酶酶解肽对9种细胞因子浓度变化情况是:绝大多数细胞因子水平都降低;碱性蛋白酶酶解肽对9种细胞因子浓度变化情况是:抗炎细胞因子水平都上调,炎症细胞因子水平都下调;从给药方式上看,两种酶解肽均是通过腹腔注射方式给药对细胞因子的影响效果更明显。根据此结果,再用胃蛋白酶酶解肽仅通过腹腔注射方式给药,设8、10、12、14和16mg/kg B.W.五个给药剂量进行家兔实验,检测家兔血清中9种细胞因子的变化,考察细胞因子浓度和给药剂量间的关系,结果发现,10~14 mg/kg间细胞因子水平浓度变化均非常显著。毛细管电泳分离两种酶解多肽,结果表明,碱性蛋白酶酶解多肽的分离效果比胃蛋白酶酶解多肽好。
人体穴位温度及细胞因子实验结果表明,33种细胞因子中有升高的有降低的,也有既升高又降低的,其中有10种给药前后变化极其显著:生长因子EGF,趋化因子GRO、IP-10、Eotaxin,粒细胞集落刺激因子G-MSF,炎症和抗炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1rα,sCD40L;人体在中午时穴位温度变化普遍比早上和晚上大,总体来讲,中渚穴温度变化幅度最大,并且各穴位在40g时变化都较为显著,其余穴位随着剂量呈一定的变化趋势;比较了上述变化显著的10种细胞因子与剂量问的关系,结果表明,同类细胞因子随着剂量递增变化趋势大体一致,并且仍是在40g时各细胞因子变化都很明显,推测40g是人体服用螺旋藻多肽的最佳剂量。
螺旋藻多肽主要是在肠粘膜免疫系统中通过NF-κB、JAK/STAT等信号通路调控细胞因子的表达进而控制人体的健康,总之,可归纳为一句话“细胞因子网络控制了免疫细胞网络,肠道中的食品控制着细胞因子网络”,初步确定了食品在肠道中的信号通路。本研究首次组织志愿者进行人体实验,通过考察手少阳三焦经络上的六个穴位、及其早中晚温度和血清中细胞因子的水平三者分别与剂量的关系,发现三者和剂量都存在一定的依赖性,温度和细胞因子的关系已有实验证明,穴位和细胞因子间的关系,初步探索了食品穴位归经的方法,假想为穴位归经可能是免疫细胞的循行路线,同时也为中草药的归经提供了新思路。