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阳离子脂质体是最有潜力的基因载体之一,具有免疫原性低、插入基因片段大小不受限制和制备简便等优点。但由于其转染效率较低和具有一定毒性,限制了其应用。人们一直致力于合成新结构阳离子类脂,构建阳离子脂质体,以获得高效低毒基因载体。本论文设计了两个系列阳离子三肽类脂,分别以赖氨酸和鸟氨酸三肽为头部,氨基甲酸酯键为连接键,C12和C14双碳链为疏水尾部。合成、提纯了8个化合物。所有化合物经核磁共振、质谱、红外光谱表征,证明结构正确,经高效液相色谱检测,纯度均达到90%以上。利用所合成的阳离子三肽类脂制备阳离子脂质体,经透射电镜和激光粒度仪检测结果表明,脂质体粒子基本呈球形,尺寸在100nm左右,Zeta电位为40-60mV。电泳延滞实验表明,脂质体与DNA能形成复合物,复合物粒径在200～400nm之间,Zeta电位随着N/P增加,负电势逐渐减弱,在N/P比8：1时,Zeta电位趋于零。利用所制备的阳离子脂质体作为基因递送载体,运载pGFP-N2和pGL3质粒,转染Hep-2及NCI-H460细胞,证实两个系列阳离子脂质体具有较高的转染效率,好于对照转染试剂DOTAP,部分好于Lipofectamirie200O。其中鸟氨酸三肽头部阳离子脂质体转染效率高于赖氨酸三肽头部阳离子脂质体,14碳链疏水尾部阳离子脂质体高于12碳链疏水尾部阳离子脂质体。使用阳离子脂质体转运小干扰RNA (siRNA)沉默A549荧光素酶基因,结果显示阳离子脂质体转运siRNA可高效沉默目的基因,沉默效率最高可达75%。细胞摄入研究结果显示,部分阳离子脂质体运载siRNA的细胞摄入量可达到80%,高于DOTAP。采用MTT法证实阳离子脂质体细胞毒性较低,细胞存活率达到90%以上。皮下种植A549细胞建立荷瘤小鼠模型,用脂质体CDO14运载siRNA沉默荷瘤小鼠肿瘤Iuciferase基因,VEGF基因和c-Myc基因。结果显示,CD014运载siRNA能高效沉默Luciferase基因,沉默效率达到70%,优于DOTAP。脂质体CDO14能共转运VEGF和c-Myc siRNA进入肿瘤细胞,使两种基因同时发生沉默。采用TUNEL法观察细胞凋亡情况,从形态学上表现为核断裂,证实脂质体三肽类脂CDO14运载siRNA具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。注射CDO14/siRNA复合物后,小鼠体重未受影响。通过检测小鼠血清生化指标,脂质体CD014对荷瘤小鼠的肝脏和肾脏功能没有显著影响。证明三肽类脂CDO14对小鼠没有明显毒性。研究结果表明,本文合成的阳离子三肽类脂具有较高的体内、外核酸转运能力,可为基因转运提供效率较高、安全低毒的,具有应用潜力的新型非病毒基因载体。