获得性盐敏感大鼠肾脏CLC-K2、NKCC2和NCC的表达的改变及盐摄入对其影响

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目的:观察血管紧张素Ⅱ诱导的盐敏感性大鼠,肾脏CLC-K2、NKCC2和NCC表达量的改变,及高盐、低盐饮食对其表达量的影响。  方法:以皮下输注425ng.kg-1.min-1AngⅡ的SD大鼠为实验组,正常SD大鼠作为对照组。2周后将实验组与对照组均分为高盐与低盐摄入组,分别饲以含4%Nacl的高盐及0.01%Nacl的低盐饲料,观察5周,期间监测一般项目、肾脏钠、氯代谢及肾功能相关指标,分别于饲喂高低盐饲料2周、5周后处死大鼠,以免疫组化的方法观察肾脏CLC-K2、NKCC2和NCC表达,以荧光定量PCR及westernblot实验方法分别测定上述通道转运体蛋白及通道在mRNA及蛋白质水平的的表达。  结果:输注AngⅡ2周的实验组大鼠较对照组血压明显升高,(146.4±1.9)VS(109.9±4.0)mmHg(P<0.05),CLC-K2、NKCC2和NCC的表达无论在mRNA还是蛋白水平实验组均较对照组升高,CLC-K2mRNA水平:3.0倍(P<0.05),蛋白水平:3.0倍(P<0.05);NKCC2mRNA水平:3.2倍(P<0.05),蛋白水平:1.6倍(P<0.05);NCC的mRNA水平:6.4倍(P<0.05),蛋白水平:2.0倍(P<0.05)。饲喂高盐与低盐饲料5周后,实验组高盐饮食亚组血压进一步升高,并维持在较高水平,(170.2±4.679mmHg)。实验组低盐饮食亚组血压逐渐下降至正常,(132.3±4.587mmHg)。对照组高盐饮食亚组与低盐饮食亚组血压无明显改变,(133.7±2.741)VS(132.8±2.558)mmHg(P>0.05)。实验组高盐饲料亚组较低盐饲料亚组肾脏的CLC-K2、NKCC2和NCC的表达无论在mRNA水平还是蛋白质水平均有显著增高,CLC-K2mRNA水平:4.2倍(P<0.05),蛋白水平:1.5倍(P<0.05);NKCC2mRNA水平:2.4倍(P<0.05),蛋白水平:3.2倍(P<0.05);NCC的mRNA水平:3.0倍(P<0.05),蛋白水平:3.1倍(P<0.05)。而对照组高盐饲料亚组与低盐饲料亚组肾脏CLC-K2的表达无论在mRNA水平还是蛋白质水平均有显著降低CLC-K2mRNA水平:0.6倍(P<0.05),蛋白水平:0.3倍(P<0.05),对照组高盐饲料亚组与低盐饲料亚组肾脏NKCC2、NCC的表达无论在mRNA水平还是蛋白质水平均没有明显改变NKCC2mRNA水平:1.1倍(P>0.05),蛋白水平:1.0倍(P>0.05);NCC的mRNA水平:0.8倍(P>0.05),蛋白水平:1.0倍(P>0.05)。  结论:皮下输注AngⅡ2周后的获得性盐敏感高血压大鼠,其在高盐的条件下血压升高,肾脏CLC-K2、NKCC2和NCC的表达无论在mRNA还是蛋白水平均明显增高,此与钠氯重吸收增加,钠水潴留有关。
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