辐射对秀丽线虫的生长损伤及其防护研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:zhang5658
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目的:建立秀丽线虫的60Coγ射线辐射损伤模型,研究辐射对秀丽线虫的生长损伤及其机制,利用此模型研究白藜芦醇辐射防护作用及其机制。方法:(1)采用不同剂量(50Gy,100Gy,200Gy)60Coγ射线照射L1阶段野生型秀丽线虫(N2),观察辐射后秀丽线虫的寿命,运动能力,生殖能力,记忆能力的改变。(2)采用不同浓度(10μM,100μM,1000μM)白藜芦醇干预野生型秀丽线虫(N2),观察其对秀丽线虫寿命影响和有效的实验干预浓度。(3)采用有效浓度的白藜芦醇干预,观察60Coγ射线照射后对秀丽线虫的寿命,运动能力,生殖能力,记忆能力,评价其保护作用。(4)应用DCF荧光染色法及SOD3-GFP荧光reporter突变株CF1553 [muIs84 [pAD76 (sod-3::GFP)]],检测秀丽线虫的氧化应激水平。(5)应用实时定量PCR,检测秀丽线虫的线粒体拷贝数(mtDNA)。(6)采用秀丽线虫突变株VC199 [sir-2.1(ok434)]观察其寿命变化,探讨白藜芦醇辐射防护的有关机制。结果:(1)随着放射剂量增加,照射后的野生型秀丽线虫(N2)寿命显著缩短;受60Coγ射线照射后运动能力明显受损;记忆能力随着辐射剂量增加而显著下降;辐射后成虫期的产卵量明显减少,当剂量增加至200Gy时,可导致所有线虫不育。(2)不同浓度白藜芦醇均能延长野生型秀丽线虫(N2)的寿命,100μM与更高浓度之间无显著性差异,后续实验采用100μM为干预浓度。(3)白藜芦醇干预后,经60Coγ射线照射的秀丽线虫寿命显著延长;运动能力明显增强;记忆能力得到有效改善;产卵能力增加、卵存活率增加。(4)白藜芦醇干预可以显著改善60Coγ射线照射后秀丽线虫体内的氧化应激状态。(5)白藜芦醇干预后, 60Coγ射线照射后秀丽线虫的线粒体DNA拷贝数(mtDNA)有所增加。(6)白藜芦醇干预能延长经60Coγ射线照射的sir-2.1突变株的寿命。结论:(1)秀丽线虫是一个理想的辐射损伤研究的工具, 60Coγ射线照射对秀丽线虫造成生长损伤。(2)白藜芦醇具有良好的辐射防护作用:能够延长60Coγ射线照射后的秀丽线虫寿命;增强其运动能力;改善记忆能力;有效的保护生殖系统。(3)白藜芦醇辐射防护作用与其强有力的抗氧化作用以及对线粒体保护作用有关。(4)白藜芦醇辐射防护作用是通过非sir-2相关的途径。
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