南极磷虾磷脂酰胆碱的提纯

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南极磷虾作为一种境外生物,目前已被列入我国“第十二个五年规划”经济开发战略,开发利用南极磷虾,具有重大意义。南极磷虾虾油中磷脂含量丰富,磷脂中磷脂酰胆碱的含量高且具有特殊的生理功能,因此分离纯化南极磷虾中的磷脂酰胆碱对于深入研究它的代谢机理、生理作用及开发应用都有着重要的意义。本文从以下几个方面对南极磷虾中的磷脂酰胆碱进行了提取和分离纯化。通过正交试验确定南极磷虾虾油提取的最佳条件。采用溶剂提取法提取南极磷虾虾干中的虾油,以虾油提取率和磷脂含量作为衡量提取效果的评价指标。先通过单因素实验选择较优的有机溶液提取剂,确定六号溶剂为最佳提取剂。再对其提取温度、料液比、提取时间3个因素分别进行3水平单因素实验,通过正交实验,得到虾油提取的最佳工艺条件为提取温度30℃,料液比1:8,提取时间为90min。然后通过丙酮沉淀法对磷脂酰胆碱进行初步提取纯化,得到磷脂酰胆碱含量为23.36%的磷脂试样。本部分为虾油的中试生产提供理论依据,具有重要的经济价值和理论意义。通过柱层析法对磷脂酰胆碱进行分离纯化。实验以磷脂酰胆碱含量为23.36%的磷脂试样为原料,以磷脂酰胆碱的纯度和得率作为评价指标,研究考察固定相的种类、上样量、上样浓度、洗脱液的种类、洗脱液的流速等影响因素对纯化磷脂酰胆碱影响,探讨最佳工艺条件。结果显示,固定相为200~300目硅胶、洗脱液为氯仿:甲醇=1:1、上样浓度为1:5、流速为4ml/min的条件下,上样量为0.0200g/1g硅胶时分离提纯磷脂酰胆碱的效果最好,其磷脂酰胆碱纯度达到92.67%,且得率大于71.26%。为制备高纯度磷脂酰胆碱提供理论参考。通过高效薄层色谱扫描法对分离提取的磷脂酰胆碱与标准品进行对比分析,确定所提取物质为磷脂酰胆碱。关于从南极磷虾的脂类成分中分离提纯磷脂酰胆碱的研究至今尚未见报道,本文以丙酮为提取剂创新了磷脂酰胆碱的提取方法,获得了纯度高达90%以上的磷脂酰胆碱。为进一步研究南极磷虾中磷脂酰胆碱的分子结构以及分子种类打下基础,为以后其用于医药、食品等方面提供理论依据。
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