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目的建立下肢动脉硬化性闭塞症的动物实验模型,采用中药联合骨髓来源的血管内皮祖细胞移植的方法,观察有无促进血管新生的作用,为中药联合干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的临床应用提供新的理论基础和实验依据。方法选取36只Wistar雄性大鼠,钳夹双侧股动脉，结扎、离断分支血管,并予高脂饲料喂养,建立下肢动脉硬化性闭塞症的大鼠实验模型。在术后第12周分别选取6只,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)；处死取下肢股-腘动脉,制作病理切片。用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠的骨髓间充质干细胞,体外培养传代扩增,培养过程中加入诱导因子使其体外定向转化为血管内皮祖细胞。应用流式细胞仪对内皮祖细胞表面标记物CD34、CD133和FLK-1进行检测。以5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的血管内皮祖细胞通过肌肉注射的方式移植于24只模型大鼠的右侧后肢,同体左侧后肢相同部位注射生理盐水作为对照。从中选取12只予中药连续治疗14天,称为B组,余称为A组。治疗后第28天检测TC、TG、HDL和LDL,分别于治疗后第14天和第28天处死动物,取双下肢肌肉组织,制作病理切片,行免疫组织化学(FⅧ、BrdU)检查,计数每个视野FⅧ阳性染色的毛细血管数目。统计学处理数据,分析变化。结果通过中药和血管内皮祖细胞移植治疗28天,A组和B组血清TC、TG、HDL和LDL均较治疗前(第12周组)明显好转(P<0.05),B组治疗效果优于A组(P<0.05)。通过治疗14天和28天,A组和B组大鼠后肢肌肉组织内均有新生血管形成。各时段新生毛细血管密度B组与A组相比,平均每视野FⅧ染色阳性的毛细血管数目B组明显多于A组(P<0.05)。A组和B组大鼠右侧后肢肌肉间可见BrdU阳性染色的血管内皮细胞,左侧后肢肌肉间未见阳性染色。结论血管内皮祖细胞可以从骨髓间充质干细胞体外诱导获得,联合中药治疗肢体局部缺血的大鼠,二者共同参与血管再生或重建,增加缺血部位的毛细血管的密度,改善血供,调节血清脂质水平。