为建立一种快速检测副猪嗜血杆菌的血清学方法,本实验采用重组表达的H.parasuis细胞致死膨胀毒素B亚基蛋白(rCdtB)作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测H.parasuis血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病病毒、圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪病毒性腹泻病毒、猪蓝耳病病毒、大肠杆菌、猪链球菌2型、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和H.parasuis阳性血清,除了H.parasuis阳性血清呈阳性外,其余均为阴性,表明该方法特异性良好。批内重复和批间重复的变异系数分别为小于7%和8%。此外,将rCdt B-ELISA方法与商品化试剂盒BioChek HPS-OppA间接ELISA抗体检测方法对背景明确的116份H.parasuis阳性血清和112份H.parasuis阴性血清进行检测,商品化试剂盒阳性符合率为25%,阴性血清符合率为100%,总符合率为62%,其中rCdtB-ELISA方法对阳性血清的检出率高于商品化试剂盒。应用rCdt B-ELISA方法检测330份临床猪血清样品,结果显示,副猪嗜血杆菌抗体阳性检出率为11.8%。应用该方法对H.parasuis 7份阳性血清及4份阴性血清进行保质期试验,结果发现6个月后S/P值均大于0.2417,阴性血清的S/P值均小于0.2417,证明rCdtB-ELISA试剂盒至少可以保存6个月。