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背景和目的支气管哮喘简称哮喘,是世界范围内严重危害公众健康的一种常见病,其病因及发病机制复杂、治疗棘手,难以根除。糖皮质激素(GCs)是治疗哮喘的有效药物,已能有效控制大多数患者的症状,但长期应用可带来严重的副作用。最近发达国家的哮喘普遍增加并成为主要的健康和经济后果令人不安。寻找安全有效的哮喘治疗切入点十分迫切。Th2型细胞源性细胞因子的中心作用表明,治愈或提供长期解除哮喘症状需针对变应原特异性Th2细胞反应。哮喘患者体内存在IL-10含量下降及调节性T细胞(Tregs)功能受损。IL-10的分泌Tregs以IL-10依赖方式抑制变应原特异性Th2细胞细胞因子分泌。一种替代和更具吸引力的策略是通过诱导具有提供安全和长期减轻疾病症状潜力的变应原激活的IL-10的分泌Tregs提供内源性抑制信号。诱导抗原特异性IL-10的分泌Tregs是今后哮喘治疗一个有吸引力的领域。IL-10在IL-10的分泌Tregs的功能活动及抑制Th2反应和过敏反应中发挥重要作用,其强力的抗炎和抑制免疫性质成为一个控制哮喘反应的有吸引力的细胞因子。研究表明,某些免疫方案及钙通道阻滞剂能诱导IL-10的合成,临床上对GCs没有反应的病人在体内同样不能出现GCs诱导的IL-10的合成,诱导IL-10的合成可能有助于GCs治疗哮喘的临床疗效。有可能利用这些影响,通过GCs单独或连同其他药物治疗诱发抗原特异性IL-10的分泌Tregs,诱导IL-10的合成改善哮喘症状。环孢霉素A(CsA)是一个众所周知的通过抑制钙调神经磷酸酶(CaN)活性阻止核因子NF-AT移位到细胞核的免疫抑制剂,能抑制哮喘气道炎症,减少哮喘GCs用量,但其具体作用机制尚未阐明。本研究旨在观察CsA对卵白蛋白(OVA)诱导的小鼠哮喘模型细胞因子IL-10、IL-4、IL-5、IL-2、IFN-γ及炎症细胞、CD4~+CD25~+IL-10~+T细胞的影响,将IL-10、CD4~+CD25~+IL-10~+T细胞联系起来进一步探讨CsA抑制哮喘炎症、免疫的可能机制,为临床综合治疗及开发新药提供理论及实验依据。方法实验分为对照组,哮喘模型组,CsA组和CsA+IL-10抗体组。用OVA腹腔致敏、雾化激发建立哮喘BALB/c小鼠模型(n=40)。ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-2、IL-10和IFN-γ水平。肺组织病理切片HE、AB/PAS染色观察肺组织炎症情况。流式细胞仪检测肺组织CD4~+CD25~+IL-10~+T细胞百分率。结果CsA雾化后BALF中炎症细胞细胞数量明显减少,IL-4、IL-5、IL-2水平明显降低(p<0.01),IL-10的含量明显增高(p<0.01)。切片HE、AB/PAS染色显示肺组织及杯状细胞炎症消退明显。同时,肺组织CD4~+CD25~+IL-10~+T细胞百分率明显高于对照组及模型组(p<0.01)。使用IL-10抗体后哮喘炎症较单独使用CsA组加重。结论1 CsA可以抑制哮喘小鼠气道炎症,该项作用可能通过上调IL-10分泌来实现,CD4~+CD25~+IL-10~+T细胞可能在其中起重要作用。2 CsA通过诱发CD4~+CD25~+IL-10~+T细胞,诱导IL-10的合成可能有治疗哮喘的潜在理论和实践价值。