胶质瘤是最常见和最具侵袭性的原发性中枢神经系统肿瘤,5年病死率和复发率较高,手术切除联合放、化疗的传统疗法和近年来以小分子化合物类药物、抗体药物为主的靶向治疗及免疫治疗均无法使患者生存期得到有效延长,亟需开发新的特异性的治疗靶点。已有研究证实上皮来源的肿瘤细胞通过分泌大量免疫球蛋白促进肿瘤细胞的增殖和转移,但肿瘤来源免疫球蛋白在胶质瘤中的作用尚无报道。本研究分析了胶质瘤来源免疫球蛋白对胶质瘤细胞的作用,探索了其中的分子机制,并通过裸鼠皮下荷瘤模型探讨了将IgG作为胶质瘤治疗靶点的可能性,拟揭示免疫球蛋白潜在的致病机制,为胶质瘤的治疗提供新的思路,目前获得了以下创新性发现。为了探索免疫球蛋白在胶质瘤患者肿瘤组织中的表达及与患者预后之间的关系,本研究在GEPIA数据库中检索后发现胶质瘤组织在转录本水平表达IgG、IgM、IgA及Igκ、Igλ,进一步分析CGGA数据库发现年龄大、IDH未突变、1p/19q未缺失、WHO分级高、复发及预后不良的患者免疫球蛋白表达水平更高。为明确免疫球蛋白的表达,本研究通过免疫组织化学及免疫荧光的方法,在来源于胶质瘤患者的肿瘤组织及人胶质瘤细胞系U87、U251中检测到了IgG、IgM蛋白的表达。此外,通过蛋白质免疫印迹实验证实了U87及U251可表达IgG、IgM,且表达形式主要为分泌形式。在确定胶质瘤肿瘤组织及细胞系中表达免疫球蛋白重链及轻链,且表达水平高与患者预后不良相关后,本研究进一步探讨胶质瘤来源免疫球蛋白对胶质瘤细胞增殖及迁移等生物学功能的影响。分别在U87、U251细胞系中通过小干扰RNA（si RNA）敲低IgG或CRISPR-Cas9敲除IgG,通过Western Blot检测培养上清中的IgG验证敲减或敲除效果。CCK-8、克隆形成及Ki-67流式细胞术结果显示IgG水平降低则抑制细胞的增殖能力;伤口愈合实验及Transwell实验结果表明IgG水平降低会抑制胶质瘤细胞的迁移能力。以上结果提示胶质瘤来源的免疫球蛋白促进胶质瘤细胞的增殖及迁移。在明确了免疫球蛋白在胶质瘤中的表达及其所发挥的促肿瘤生物学功能之后,为探索免疫球蛋白促肿瘤的作用机制,本研究通过RNA-seq转录组分析以富集相关信号通路,应用Western Blot检测IgG水平下调之后通路中蛋白及其活化水平的变化。结果提示敲除IgG可通过HGF/SF-Met通路或FAK/Src通路来下调MAPK通路、PI3K/Akt通路中增殖、迁移相关蛋白的磷酸化水平。此外,本研究利用裸鼠皮下荷瘤模型证实了IgG水平降低对胶质瘤生长的抑制,并且对与细胞增殖、迁移相关蛋白的活化水平检测后发现其磷酸化水平受到了明显抑制。综上所述,本课题发现胶质瘤的肿瘤组织及细胞系均可表达免疫球蛋白,表达水平高预示患者的预后不良。胶质瘤来源的IgG通过促进肿瘤细胞增殖和迁移参与胶质瘤发生发展的病理学过程,具体的分子机制可能是肿瘤细胞分泌的IgG与细胞表面的受体结合,激活HGF/SF-Met通路或FAK/Src通路,随后启动PI3K/Akt和ERK等相关通路的激活,导致肿瘤细胞增殖及迁移。本项目立足于胶质瘤细胞来源IgG发挥的促肿瘤作用,探讨了其中的分子机制和可能的应用转化,这为靶向肿瘤微环境中的IgG在胶质瘤免疫治疗中提供了新思路。